权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ウイルス増殖を制御する細胞性因子の新しいランダム同定法の確立

控制病毒增殖的细胞因子随机鉴定新方法的建立

基本信息

批准号：
16658137
负责人：
堀本泰介
金额：
$ 2.3万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

ウイルスの増殖は様々な細胞性因子により制御される。本研究では、インフルエンザウイルスをモデルに、これらの細胞性因子を網羅的に同定する新しい方法の確立を目的とする。それは、インフルエンザウイルスに感受性の細胞由来のcDNAライブラリーを組み込んだウイルスライブラリーを利用する方法である。つまり、組み換えウイルスが感染した細胞では、そのcDNA由来の蛋白質が発現し、それがウイルス増殖に必須であれば、組み換えウイルスは抵抗性細胞においても増殖する。したがって、組み換えウイルスライブラリーを様々な感染抵抗性細胞において解析すれば、ウイルス増殖を制御する細胞困子をランダムに同定できる。この作業仮説のもと、私たちは、GFPをレポーターとした組み換えウイルスシステムを検討した。その結果、HA/NAタンデムシステムと9本鎖ベクターシステムを確立した。前者は、本来のHA分節のHA遺伝子の下流にプロモーター配列を介してNA遺伝子をタンデムに挿入することにより、bicistoronicなHA分節を構築し、本来のNA分節のNA遺伝子の変わりに外来遺伝子を搭載するシステムである。後者は、HA分節のHA遺伝子の代わりにNA遺伝子を挿入したキメラ分節を構築し、本来のNA分節のNA遺伝子の変わりに外来遺伝子を搭載するシステムであり、つまりHA分節を2本もつような9本鎖ウイルスをレスキューするシステムである。いずれのシステムでもGFPレポーター遺伝子は比較的安定に維持されることがわかった。しかし、GFP遺伝子の代わりにcDNAを挿入した場合には、その分節が組換えウイルス中に安定して維持されないことが判明した。この欠点を補うために、他のベクターシステムの検討を行い、HA/NSタンデムシステムの構築に成功した。今後は、このシステムを本研究に応用する予定である。

The growth of these cells is controlled by cellular factors. The aim of this study is to establish a new method for the identification of cytokines. A method for the formation and utilization of cDNA fragments from susceptible cells The protein of cDNA origin is expressed in infected cells, and is necessary for the propagation of resistant cells. In addition, it is necessary to establish a system for analyzing infection-resistant cells and for controlling their proliferation. This is the first time that I've seen this. Results, HA/NA profile and 9 key profiles were confirmed. The former is composed of HA gene downstream from HA gene, NA gene downstream from HA gene downstream from HA gene downstream from NA gene downstream from HA gene downstream from NA gene The HA sub-section and HA sub-section are composed of NA sub-sections, NA sub-sections and HA sub-sections. The HA sub-section and NA sub-sections are composed of HA sub-sections and HA sub-sections. In the middle of the game, the GFP was released and the stability of the game was maintained. The GFP gene was inserted into the cDNA sequence, and the fragment was assembled and maintained in the cDNA sequence. This is a problem that needs to be solved, and the HA/NS system is successfully constructed. In the future, this study will be conducted on a regular basis.