神経発生期の遺伝子不安定性制御破綻と神経系疾患発症との関連解明に向けた基盤研究

旨在阐明神经发生过程中基因不稳定调节破坏与神经系统疾病发病之间关系的基础研究

• 批准号: 16659015
• 负责人: 福嶋 伸之
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kinki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659015/
• 关键词: 神経発生; 細胞分化; 遺伝子修復; 遺伝子不安定化; 非相同組み換え; 神経幹細胞

神経発生は分裂能力を有する神経幹細胞が非分裂細胞である神経細胞に分化する基本的生命現象である。最近遺伝子非相同組み換えに関わる分子が神経発生時になんらかの役割を果たしていることが示された。このことは神経発生時においても遺伝子が積極的に不安定(DNA2重鎖の切断[DNA double strand break/DSB]および修復/再会合)となる可能性を示唆している。これらの遺伝子のうちいくつかは神経疾患の原因遺伝子であることから遺伝子不安定性の制御破綻が神経疾患の発症に関連していることをも示している。またある種の内分泌撹乱物質が遺伝子の不安定化に影響する可能性も示唆されている。昨年度の研究より、マウス胎仔脳におけるDSB修復にはDNAリガーゼ活性だけでなくDNAポリメラーゼ活性も関わっていること、大脳皮質由来の培養神経細胞の生存率はDNA再結合活性と相関していること、が示された。用いたDNA再結合活性の測定法は半定量的であったので、本年度では、定量的かつ高感度な方法の開発を試みた。96ウエルプレートに2本鎖DNAオリゴヌクレオチドを固相化し、続いてビオチン標識2本差DNAおよびT4DNAリガーゼを添加した。16℃で18時間反応させた後、結合したビオチン標識DNA量をアビジン-ビオチン-パーオキシダーゼ複合体(ABC)および発色試薬TMBを用いて測定した。バックグランドのさらなる低減化が課題であるが、6Weiss unitの検出が可能であった。今後、細胞や組織抽出液を用いてDNA再結合活性を比較検討する。また代表的な内分泌撹乱物質(ビスフェノール、ノニルフェノール)の神経発生に及ぼす効果を調べた。これらの物質をあらかじめPheochromocytoma12細胞に暴露すると、細胞死を誘導することなく神経成長因子による神経分化を阻害することが分かった。今後、これらの物質の暴露によりDSB生成やDSB修復が影響を受けているかどうかについて検討する。

The supernatural economy has the ability to <s:1> divide, を has する supernatural stem cells が, non-dividing cells である, supernatural cells に, differentiation する, and basic life phenomena である. Recent heritage 伝 み child of the same group in え に masato わ る molecular が god 経 発 he に な ん ら か の "を cut fruit た し て い る こ と が shown さ れ た. こ の こ と は god 経 発 he に お い て も posthumous son 伝 が positive に unrest (DNA2 heavy lock の cut [DNA double strand break/DSB] お よ び repair/meet again) と な を る possibility in stopping し て い る. こ れ ら の posthumous son 伝 の う ち い く つ か は 経 god cause of disease の survived 伝 で あ る こ と か ら posthumous son 伝 labile の suppression flaw が god 経 disorders の 発 disease に masato even し て い る こ と を も shown し て い る. The する possibility of the に effect of またある kinds of <s:1> endocrine 撹 disorder substances が resulting in 伝 particle <s:1> instability に is likely to suggest されて またある る る る る る. Yesterday's annual の research よ り, マ ウ ス tire tsai 脳 に お け る DSB repair に は DNA リ ガ ー ゼ active だ け で な く DNA ポ リ メ ラ ー ゼ active も masato わ っ て い る こ と origin, big 脳 cortex の の culture god 経 cells survival は DNA recombination activity と phase masato し て い る こ と, が さ れ た. Use い た の DNA recombination activity assay は semiquantitative で あ っ た の で, this year's で は, quantitative か つ Gao Gan な methods の open 発 を try み た. 96 ウ エ ル プ レ ー ト に 2 this lock オ DNA リ ゴ ヌ ク レ オ チ ド を solid-phase し, 続 い て ビ オ チ ン logo 2 the difference of DNA お よ び T4DNA リ ガ ー ゼ を add し た. 16 ℃ で 18 time against 応 さ せ た, after combining し た ビ オ チ ン identify DNA quantity を ア ビ ジ ン - ビ オ チ ン - パ ー オ キ シ ダ ー ゼ complex (ABC) お よ び 発 color try 薬 TMB を with い て determination し た. バ ッ ク グ ラ ン ド の さ ら な る low reduced が subject で あ る が, 6 weiss unit の 検 out が may で あ っ た. In the future, the cell や tissue extract を will be compared for 検 and する using the を DNA rebinding activity. ま た represent な endocrine 撹 disorderly substances (ビ ス フ ェ ノ ー ル, ノ ニ ル フ ェ ノ ー ル) の god 経 発 に and ぼ す unseen fruit を adjustable べ た. こ れ ら の material を あ ら か じ め に Pheochromocytoma12 cells exposed to す る と, induced cell death を す る こ と な く god 経 growth factor に よ る 経 differentiation を resistance against god す る こ と が points か っ た. In the future, こ れ ら の material の exposed に よ り DSB generated や DSB repair が を by け て い る か ど う か に つ い て beg す 検 る.

项目成果

リゾホスファチジン酸

溶血磷脂酸

• 发表时间: 2004
• 期刊: 生体の科学 55
• 作者: Ishii;I.;Fukushima;N.;Ye;X.;Chun;J.;福嶋伸之
• 通讯作者: 福嶋伸之

Morphological changes in neurons by self-organized patterned films

• DOI: 10.1380/ejssnt.2005.159
• 发表时间: 2005
• 期刊: E-journal of Surface Science and Nanotechnology
• 影响因子: 0.7
• 作者: Akinori Tsuruma;Masaru Tanaka;N. Fukushima;M. Shimomura

LPA in neural cell development

• DOI: 10.1002/jcb.20093
• 发表时间: 2004-08-01
• 期刊: JOURNAL OF CELLULAR BIOCHEMISTRY
• 影响因子: 4
• 作者: Fukushima, N