アポトーシス細胞を用いた腫瘍拒絶ワクチン療法の開発

利用凋亡细胞开发肿瘤排斥疫苗疗法

• 批准号: 16659105
• 负责人: 山本 哲郎
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659105/
• 关键词: 腫瘍ワクチン; 腫瘍免疫; アポトーシス; 腫瘍移植実験; BALB; cマウス; Meth A細胞; L5178Y細胞; 移植腫瘍; ワクチン; Meth-A細胞; L5178Y-ML細胞; TUNEL法

BALB/cマウス由来の2種の腫瘍細胞株、Meth A細胞およびL5178Y-ML細胞を同系マウスの皮膚に移植する腫瘍実験系を用いて、アポトーシス細胞の前投与による腫瘍拒絶免疫獲得の有無を検討した。両株化細胞共に、43℃で50〜60分処理することでアポトーシスを誘導した。Meth A細胞10^5個をマウス皮内に接種したところ、3〜4日後から腫瘍の増殖が観察可能となり、30日前後で肺転移などによりマウスは腫瘍死した。皮内接種の2日前および7日前にアポトーシスに陥らせたMeth A細胞5x10^6をそれぞれ皮内投与しておくと、皮内接種した腫瘍細胞は全く増殖できずに瘢痕除去された。まずMeth A細胞を移植し、その後、5日目と12日目にアポトーシス細胞を投与するという後処置実験においても、腫瘍の増殖は有意に抑制された。アポトーシス細胞の替わりに、100℃で3分処理したMeth A細胞を投与した場合は、対照マウスの場合と同様に、腫瘍が生着した。無処置の細胞をアポトーシス細胞の替わりに前投与し、その部位を切除した後に腫瘍細胞を移植した場合にも、対照マウスと同様に腫瘍は生着した。すなわち腫瘍拒絶能の獲得は、アポトーシス細胞投与の場合のみ観察された。Meth A細胞の替わりにL5178Y-ML細胞をアポトーシスに陥らせて前投与しても、Meth A細胞に対する拒絶能を獲得させることはできなかった。これは細胞特異的な拒絶能を意味しており、免疫学的な特異性が存在すると解釈された。現在、この逆の組み合わせによる確認を進めている。腫瘍拒絶のメカニズムを解明する目的で、拒絶過程の局所を組織学的に検討したところ、腫瘍塊の中心部壊死と、周辺からの肉芽の進入による壊死細胞の吸収が観察された。この状態のマウスから脾臓のリンパ球を分離し、蛍光標識したMeth A細胞に対する細胞傷害活性を調べたが、明らかにできなかった。

BALB/c マ ウ ス origin の two の swollen sores cell lines, Meth A cell お よ び L5178Y cells - ML を homologous マ ウ ス の に skin graft す る swollen sores be を 験 department with い て, ア ポ ト ー シ の ス cells before and に よ る swollen sores have refused to immune to obtain の without を beg し 検 た. Two lines of cultured cells were treated with に at 43 ° C で for 50 to 60 minutes to induce する た とでアポト シスを シスを シスを シスを シスを た た. Meth A cell 10 ^ 5 を マ ウ ス intradermal に vaccination し た と こ ろ, after 3 ~ 4 か ら swollen sores の raised colonization が 観 examine possible と な り で lung planning, 30 before removing な ど に よ り マ ウ ス は swollen sores die し た. Intradermal inoculation の 2nd お よ に び 7 ア ポ ト ー シ ス に 陥 ら せ た Meth A 5 x10 cell ^ 6 を そ れ ぞ れ cast with intradermal し て お く と, intradermal inoculation し た は く raised all swollen sores cells reside で き ず に scar removal さ れ た. し を ま ず Meth A cell transplantation, そ の, after 5 yard と 12 に ア ポ ト ー シ ス cells を cast and す る と い う 処 place after be 験 に お い て も, swollen sores の raised colonization は intentionally に inhibit さ れ た. の ア ポ ト ー シ ス cells for わ り に, 100 ℃ で 3 処 Richard し た Meth cast with A cell を し は た occasions, polices according to マ ウ ス と の occasions with others に, swollen sores が with し た. No 処 buy の cell を ア ポ ト ー シ の ス cells for わ り に cast and し そ before removal of を の area し た を に swollen sores cells after transplantation し た occasions に も, polices according to マ ウ ス と with others に swollen sores は with し た. The すなわち abscess refuses to be able to <s:1> obtain アポト, アポト シス シス シス cells are injected into the <s:1> site み観 examination された. Meth A cell の for わ り に L5178Y cells - ML を ア ポ ト ー シ ス に 陥 ら せ て before and し て も, Meth A cell に す seaborne る refused to can get さ を せ る こ と は で き な か っ た. The な rejection that is specific to cells is を, which implies that the な specific が in immunology exists すると interpretation された. Now, the <s:1> <s:1> inverse み group み and わせによる confirm that を enters めて る る る. Swollen sores refused の メ カ ニ ズ ム を interpret す る purpose で bureau を histology, refused to process の に beg し 検 た と こ ろ 壊 death to the center, swollen sores の と, zhou 辺 か ら の granulation の into に よ る 壊 dead cells の suction 収 が 観 examine さ れ た. こ の state の マ ウ ス か ら splenic の リ ン パ ball を separation し, 蛍 light logo し た Meth A cell に す seaborne cell damage activity を adjustment る べ た が, Ming ら か に で き な か っ た.