血中NAP-1〜4測定の開発と肥満症の進展機構に関する研究

血液NAP-1-4测定的进展及肥胖进展机制的研究

• 批准号: 16659244
• 负责人: 森 昌朋
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659244/
• 关键词: Processing; NAP; Prohormone Convertase; 摂食抑制; 摂食制御

核内ホルモン受容体PPARγ activatorで刺激される分泌性のnatural PPARγ-induced secreted protein(nPGIS)をクローニングした。この蛋白は3T3-L1細胞(脂肪細胞)にも発現している。このnPGISは脂肪細胞から分泌され、人血中で認められるLeptinやAdiponectinとは構造的に全く異なるものである。Sequence解析により、この蛋白はprohormone convertasによりposttranslatlonal processingを受けるKR/RRが3カ所存在する事が判明し、4種類の異なった構造を有する分泌蛋白が生ずる可能性があり、nPGIS-associated peptide(NAP-1〜4)と命名した。これらの部位に一致するpeptideまたは蛋白を合成し、ラット脳内に投与したところ、NAP-1のみに一致するpeptide投与が摂食抑制作用を示し、NAP-2/3/4に一致するpeptideおよび蛋白の脳内投与では摂食に影響を及ぼさなかった。またNAP-1抗体由来IgGの脳内投与は摂食亢進を示したが、NAP-2/3/4抗体由来IgGの脳内投与は摂食に影響を与えなかった。そこで、NAP-1抗体由来IgGを用いてラット視床下部抽出液、ラット髄液のWestern blotを行い、NAP-1が存在することを確認した。さらにこのNAP-1抗体由来IgGとBiotin標識NAP-1 peptideを用いてcompetitive ELISAを開発し、5ng/tube NAP-1 peptideを測定する系を確立した。この系を用いて測定したところ、正常ラットでの髄液中NAP-1濃度は0.22μg/mlで、血中濃度は4.82μg/mlを示し、18時間の絶食でのラット血中NAP-1は6.72μg/mlと増加していた。またZucker obeseラットでの血中NAP-1は9.27μg/mlとさらに増加していた。血中NAP-1濃度の変化と摂食量との関係はまだ不明の段階であるが、これらの予備実験の成績から、NAP-1はラット髄液中、血中に存在し、肥満と関連することを示唆しており、NAP-1の測定系の確立は肥満症に関わる病態の解明に有用であることを示唆している。

The nuclear receptor PPARγ activator stimulates the secretion of natural PPARγ-induced secreted protein(nPGIS). This protein is found in 3T3-L1 cells (adipocytes). The expression of Leptin in human blood is different from that in adipocytes. Sequence analysis revealed that this protein is subject to posttranslational processing in prohormone convertas, and it is possible that secreted proteins with four different structures can be produced. Therefore, the nPGIS-associated peptide(NAP-1 ~ 4) was named. The protein synthesis, protein delivery and food inhibition of NAP-1 and NAP-2/3/4 were shown. NAP-1 antibody is derived from IgG and is influenced by IgG and NAP-2/3/4 antibody. The presence of NAP-1 was confirmed by Western blot analysis of the lower part of the bed extract and NAP-1 antibody The NAP-1 antibody was developed using a competitive ELISA and the NAP-1 peptide assay was established at 5ng/tube. NAP-1 concentrations in serum and blood increased from 0.22μg/ml and 4.82μg/ml to 6.72μg/ml after 18 hours of fasting. NAP-1 in the blood increased to 9.27μg/ml. The relationship between NAP-1 concentration in blood and food intake is divided into unknown stages, such as the results of preparation, NAP-1 concentration in blood, the existence of fat in blood, and the relationship between fat and food intake.

项目成果

Thyrotropin-releasing Hormone (TRH) specific interaction between amino terminus of P-Lim and CREB binding protein (CBP)

• DOI: 10.1016/j.mce.2004.10.005
• 发表时间: 2005-01-14
• 期刊: MOLECULAR AND CELLULAR ENDOCRINOLOGY
• 影响因子: 4.1
• 作者: Hashimoto, K;Yamada, M;Mori, M
• 通讯作者: Mori, M

Allelic losses on chromosome 3p are accumulated in relation to morphological changes of lung adenocarcinoma.

• DOI: 10.1038/sj.bjc.6602005
• 发表时间: 2004-09-13
• 期刊: British journal of cancer
• 影响因子: 8.8

Inhibition of appetite by nasal leptin administration in rats.

鼻饲瘦素对大鼠食欲的抑制作用。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Int J Obes Relat Metab Disord 29
• 作者: 日出山拓人;郭 伸;Nikrodhanond AA;Hashikoto K;Tomaru T;Yamada M;Hashimoto K;Oh-I S;Nikrodhanond AA;Tomaru T;Hashimoto K;Oh-I S;Nikrodhanond AA;Hashikoto K;Hashimoto K;Oh-I S;Hashimoto K;Yamada E;Shimizu H;Oh-I S;Hashimoto K;Shimizu H
• 通讯作者: Shimizu H

Fenofibrate, troglitazone, and 15-deoxy-δ^<12,14>-prostaglandin J_2 close KATP cannels and induce insulin secretion.

非诺贝特、曲格列酮和 15-脱氧-δ^<12,14>-前列腺素 J_2 关闭 KATP 通道并诱导胰岛素分泌。

• 发表时间: 2004
• 期刊: J Pharmacol Exp Therap 310
• 作者: Suzuki;H.;Hashimoto K;Yamada E;Shimizu H;Oh-I S;Ishii S;Saito T;Iijima H;Shimomura K
• 通讯作者: Shimomura K

Molecular mechanisms associated with leptin resistance: n-3 polyunsaturated fatty acids induce alterations in the tight junction of the brain

• DOI: 10.1016/j.cmet.2005.04.004
• 发表时间: 2005-05-01
• 期刊: CELL METABOLISM
• 影响因子: 29
• 作者: Oh-I, S;Shimizu, H;Mori, M
• 通讯作者: Mori, M