ギャップ結合を介した血管内皮細胞由来弛緩因子による傍糸球体細胞レニン分泌制御機構

血管内皮细胞源性舒张因子通过间隙连接调节肾小球旁细胞肾素分泌的机制

• 批准号: 16659437
• 负责人: 田邉 信明
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: University of Yamanashi
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659437/
• 关键词: レニン産生細胞; ギャップ結合; 血管由来過分極因子; 内皮細胞; コネキシン

血管作動性物質はin vivo, in vitroにおいて傍糸球体装置のレニン分泌調節の主な因子である。一般に、血管収縮性物質(アンギオテンシン、エンドセリン等)はPKCの活性化、細胞内カルシウムの増加を介してレニン分泌を抑制し、逆に血管拡張性物質(一酸化窒素、PGE)はcAMR cGMP経路を介してレニン分泌を促進している。血管由来過分極因子(endothelium-derived hyperpolarization factor : EDHF)は血管内皮細胞により産生され、NOやprostanoidsとは異なる血管拡張物質とされる。EDHFが、血管平滑筋から分化した細胞と考えられている傍糸球体レニン産生細胞(顆粒細胞)におけるレニン産生を制御している可能性は高い。本研究はレニン産生制御機構におけるギャップ結合とEDHFの役割を検討するものであり、その結果、以下のような知見を得た。1)培養ヒト腎糸球体内皮細胞において、機能的なギャップ結合が内皮細胞に存在することをdye transfer assayを用いて、またギャップ結合蛋白であるCx43、Cx40、Cx37が存在することを蛍光抗体法及びウェスタンブロット法を用いて明らかにした。2)腎皮質からのレニン産生細胞の初代培養を確立した、初代レニン産生細胞にはCx43は存在せず、dye transfer assayによっても、ギャップ結合介在性細胞間コミュニケーションは認めならなかった。以上の結果から、培養レニン細胞と糸球体内皮細胞との間には、ギャップ結合を介したコミュニケーションが無いことが明らかとなった。従って混合細胞培養系を使ったEDHFによるレニン分泌制御機構の解析は不可能であり、現在単分離糸球体と腎かん流法において検討を行っている。

Vasoconstrictive substances レニ in vivo, in vitroにお て て paristospheroid apparatus <s:1> レニ レニ secrete regulatory <s:1> principal な factor である. General に, blood vessels, 収 shrinkage material (ア ン ギ オ テ ン シ ン, エ ン ド セ リ ン etc) は PKC の activeness, intracellular カ ル シ ウ ム の raised を requirement by dielectric し て レ ニ ン secretion を し, inverse に vessel company, extensional matter (acidification smothering element, PGE) は cAMR cGMP 経 road を interface し て レ ニ ン secretion を promote し て い る. endothelium-derived hyperpolarization factor (EDHF) : によ vascular endothelial cells によ され produce され, NOやprostanoidsと strange なる vascular 拡 tensor とされる. EDHF が, vascular smooth muscle か ら differentiation し た cells と exam え ら れ て い る alongside si sphere レ ニ ン cells (granulosa cells) に お け る レ ニ ン produce を suppression し て い は high い る possibilities. This study は レ ニ ン produce suppression institutions に お け る ギ ャ ッ プ combining と EDHF の service cut を beg す 検 る も の で あ り, そ の results, the following の よ う な knowledge を た. 1) develop ヒ ト に renal si sphere endothelial cells お い て, functional な ギ ャ ッ プ combining に が endothelial cells exist す る こ と を dye transfer Assay を with い て, ま た ギ ャ ッ プ binding protein で あ る Cx43, Cx40 and Cx37 が exist す る こ と を 蛍 optical method of antibody and び ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ を ト method with い て Ming ら か に し た. 2) renal cortex か ら の レ ニ ン cells の original education を establish し た, original レ ニ ン cells に は Cx43 は exist せ ず, dye transfer assay に よ っ て も, ギ ャ ッ プ combined interface between sex cells コ ミ ュ ニ ケ ー シ ョ ン は recognize め な ら な か っ た. の above results か ら, cultivating レ ニ ン cells と と si sphere endothelial cells between の に は, ギ ャ ッ プ combining を interface し た コ ミ ュ ニ ケ ー シ ョ ン が no い こ と が Ming ら か と な っ た. 従 っ て mixed cell culture system を make っ た EDHF に よ る レ ニ ン secretion system of the royal institution の parsing は impossible で あ り, now 単 separation si sphere と renal か ん flow method に お い て 検 line for を っ て い る.