臍帯血造血幹細胞移植免疫不全マウスを用いたヒトマラリアモデルの作製

免疫缺陷小鼠脐带血造血干细胞移植建立人类疟疾模型

• 批准号: 17659122
• 负责人: 平山 謙二
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659122/
• 关键词: ヒトマラリア感染モデル; 臍帯血造血幹細胞; CD34; NOGマウス

目的:ヒトマラリアである熱帯熱マラリアの動物モデルを作製しワクチンや抗マラリア薬の開発に資する。方法と結果:臍帯血より高純度の造血幹細胞の分離精製:市中病院より、検査に用いた後の廃臍帯血を入手し、12時間以内に実験室に搬送を行った。まず、臍帯血はフイコールハイパック比重遠心法により単核球分離を行った。造血幹細胞のマーカーであるCD34陽性の血液幹細胞分画をミルテニル社のMACSビーズ法により精製を行った。その結果、2度カラム精製を行う事で、CD34陽性細胞の純度を95%以上にあげる事が可能となった。'確認はFACS Culiberによる検査で行った。また、CD34陽性細胞は単核球中に0.3%程度存在する事が確認された。赤血球期ヒトマラリア原虫の実験室内での培養実験:ヘマトクリット値5%のヒト0型赤血球と、10%ヒトB型あるいはA型血清を含むRPMI1640培養液を用いて、CO_2,O_2,N_2がそれぞれ5%、5%、90%の混合ガス中で培養を行った。その結果、赤血球期ヒトマラリア原虫の生活史は、ほぼ48時間で周期することが確認された。また、これらの培養ヒトマラリア原虫については、ゼラチン濃縮法を用いる事で、輪状体を除くヒトマラリア原虫を60%程度まで濃縮できる事を確認した。造血幹細胞の免疫不全マウスヘの移入:熱帯医学研究所倫理委員会の審査を受け承認された。実験中央研究所よりNOGマウス(雌4週令)を購入し、長崎大学実験動物施設のSPF室にて飼育した。放射線照射により骨髄を処理したのち、眼窩より脳底静脈叢に臍帯血由来のCD34陽性の細胞を注入した。6週後より末梢血にヒトB細胞マーカー陽性細胞を検出し、その後CD3陽性のT細胞が出現したが、その後ヒト赤血球の出現はなかった。

Objective: To control the development of anti-inflammatory drugs in animals. Methods and Results: The separation and purification of high purity hematopoietic stem cells from umbilical cord blood: The umbilical cord blood was collected from the hospital and transferred to the laboratory within 12 hours after examination. The center of gravity is the center of gravity, and the center of gravity is the center of gravity. Hematopoietic stem cell analysis of CD34 positive blood stem cells The purity of CD34-positive cells is more than 95%. 'Confirm that FACS Culiber checks are performed. The presence of CD34 positive cells in 0.3% of the nuclei was confirmed. The culture of erythrocytes in laboratory was carried out in medium containing RPMI1640, CO_2, O_2, N_2, 5% and 90% mixtures of 5% and 10% erythrocytes of type 0 and 10% erythrocytes of type B respectively. The results of this study indicate that the life history of the red blood cells is different from that of the control group. The method of concentration is used to determine the concentration of the protozoa in the culture medium. Hematopoietic stem cell immune deficiency and transplantation: the review of the Ethics Committee of the Institute of Thermal Medicine Nagasaki University SPF Laboratory for Animal Care Irradiation treatment of bone marrow, eye socket, basal venous plexus, umbilical cord blood and CD34 positive cells were injected. 6 weeks later, CD3 positive T cells appeared in peripheral blood, and CD3 positive T cells appeared in peripheral blood.

项目成果

A SNP in the ABCC11 gene is the determinant of human earwax type

• DOI: 10.1038/ng1733
• 发表时间: 2006-03-01
• 期刊: NATURE GENETICS
• 影响因子: 30.8
• 作者: Yoshiura, K;Kinoshita, A;Niikawa, N
• 通讯作者: Niikawa, N

Limited allelic diversity of Plasmodium falciparum merozoite surface protein 1 gene from populations in the Solomon Islands

• DOI: 10.4269/ajtmh.2006.74.31
• 发表时间: 2006-01-01
• 期刊: AMERICAN JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE AND HYGIENE
• 影响因子: 3.3
• 作者: Sakihama, N;Ohmae, H;Tanabe, K
• 通讯作者: Tanabe, K

The involvement of immunoproteasomes in induction of MHC class I-restricted immunity targeting Toxoplasma SAG1

• DOI: 10.1016/j.micinf.2005.10.023
• 发表时间: 2006-04-01
• 期刊: MICROBES AND INFECTION
• 影响因子: 5.8
• 作者: Ishii, Kazunari;Hisaeda, Hajime;Himeno, Kunisuke
• 通讯作者: Himeno, Kunisuke

Associations between frequencies of a susceptible TNF-□ promoter allele and protective α-thalassemias and malaria parasite prevalence in Vanuatu.

瓦努阿图易感 TNF-□ 启动子等位基因频率与保护性 α-地中海贫血和疟疾寄生虫流行率之间的关联。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Trop.Med.Int.Hlth 6
• 作者: Ubalee;R.;Kikuchi;M.;K.Hirayama 他
• 通讯作者: K.Hirayama 他

Microsatellite Polymorphism in the Heme Oxygenase-1 Gene Promoter Is associated with Susceptibility to Cerebral Malaria.

血红素加氧酶 1 基因启动子中的微卫星多态性与脑型疟疾的易感性相关。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Jap.J.Inf.Dis 58
• 作者: Takeda;M.;Kikuchi;M.;K.Hirayama 他
• 通讯作者: K.Hirayama 他