脂肪細胞分化におけるDNAメチル化酵素2の役割

DNA甲基转移酶2在脂肪细胞分化中的作用

• 批准号: 17659277
• 负责人: 北 徹
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659277/
• 关键词: 脂肪細胞; レトロウイルス; DNAメチル化

脂肪細胞における機能的遺伝子群を明らかにするため、遺伝子トラップ型レトロウイルスを用いて脂肪細胞分化に必須の遺伝子の探索を行った。その結果、DNAメチル化酵素2(DNA methyl transferase2;DNMT2)が脂肪細胞の分化に関与していることが判明した。我々の研究が脂肪細胞特異的DNAメチル化を標的とした、治療法の開発につながると考えられる。まず、メチル化状態が異なるDNAの部位を検出するためにMethylation-sensitive-representational difference analysis(MS-RDA)法を用いた。脂肪細胞が分化することにより、転写因子のpref1はその発現が低下することが知られている。我々は脂肪細胞の分化過程において、pref1の発現制御領域がメチル化を受けるかどうかについて検討した。分化後の3T3-L1細胞のgenomic DNAをbisulfite modificationし、pref1 promoterを解析した。すると、メチル化を受けると考えられるcytosineがuracilに置き換えられていることが判明した。現在このメチルがDNMT2によるものかどうかをDNMT2 knockdown細胞およびコントロール細胞において検討中である。つぎに、DNMT2複合体の解析も開始した。タグ付きDNMT2蛋白を3T3-L1細胞に発現させ、分化前後の脂肪細胞から核蛋白を抽出した。抗タグ抗体を用いて、DNMT2複合体のアフィニティー精製を行っており、今後マススペクトメトリーと蛋白データベースから、DNMT2複合体を構成する蛋白を網羅的に解析する予定である。さらに脂肪細胞特異的DNMT2の役割を明らかにするために、DNMT2の第一エクソンをLoxPで挟んだDNAの作製を開始した。

Adipose cell differentiation function gene subpopulation to explore the use of adipocyte differentiation essential gene DNA methyl transferase 2(DNMT2) was found to be involved in adipocyte differentiation. Our research has led to the development of adipocyte-specific DNA markers and therapeutics. Methylation-sensitive-representative difference analysis(MS-RDA) was used to detect DNA sites with different chemical states. Adipose cell differentiation, gene expression and gene expression are reduced. I am interested in the differentiation of adipocytes, and the development and control of prif 1. Genomic DNA of differentiated 3T3-L1 cells was analyzed by bisulfite modification and PREF1 promoter. The answer is yes. DNMT2 knockdown cell is now in the middle of a search. The analysis of DNMT2 complex begins. DNMT2 protein was detected in T3-L1 cells, and nuclear protein was extracted from adipocytes before and after differentiation. Anti-tumor antibody use, DNMT2 complex purification, future selection, protein analysis, DNMT2 complex composition protein network analysis The production of adipocyte-specific DNMT2 DNA has begun.

项目成果

Expression of the novel Snai-related zinc-finger transcription factor gene Smuc during mouse development.

• DOI: 10.3892/ijmm.15.6.945
• 发表时间: 2005-06
• 期刊: International journal of molecular medicine
• 影响因子: 5.4
• 作者: Xin Zhuge;H. Kataoka;Makoto Tanaka;T. Murayama;T. Kawamoto;H. Sano;Kiyonori Togi;R. Yamauchi;Y. Ueda;Yang Xu;S. Nishikawa;T. Kita;M. Yokode

Expression of Smad1 is directly associated with mesangial matrix expansion in rat diabetic nephropathy

• DOI: 10.1038/labinvest.3700400
• 发表时间: 2006-04-01
• 期刊: LABORATORY INVESTIGATION
• 影响因子: 5
• 作者: Matsubara, T;Abe, H;Doi, T
• 通讯作者: Doi, T

Acetylation of GATA-4 is involved in the differentiation of embryonic stem cells into cardiac myocytes

• DOI: 10.1074/jbc.m412428200
• 发表时间: 2005-05-20
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Kawamura, T;Ono, K;Hasegawa, K
• 通讯作者: Hasegawa, K

Essential role of Hand2 in interventricular septum formation and trabeculation during cardiac development.

Hand2 在心脏发育过程中室间隔形成和小梁形成中的重要作用。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Biochem Biophys Res Commun. In press
• 作者: Togi K;Yoshida Y;Matsumae H;Nakashima Y;Kita T;Tanaka M.
• 通讯作者: Tanaka M.

Histone acetyltransferase activity of p300 is required for the promotion of left ventricular remodeling after myocardial infarction in adult mice in vivo

• DOI: 10.1161/circulationaha.105.585182
• 发表时间: 2006-02-07
• 期刊: CIRCULATION
• 影响因子: 37.8
• 作者: Miyamoto, S;Kawamura, T;Hasegawa, K
• 通讯作者: Hasegawa, K