RNAとRNA結合型コアクチベーターの相互作用-転写と選択的スプライシングの接点

RNA 和 RNA 结合共激活因子之间的相互作用 - 转录和选择性剪接之间的界面

• 批准号: 17659281
• 负责人: 鯉淵 典之
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659281/
• 关键词: RNA; 転写調節; 選択的スプライシング; コアクチベーター; RNA結合蛋白; CoAA; CoAM; 転写因子

近年我々がクローニングしたcoactivator activator(CoAA)は転写活性化因子として機能するほか、RNA結合ドメインであるRNA recognition motif(RRM)を持ち、プロモーター依存性選択的スプライシングを活性化する因子として機能する。Steroid receptor RNA activator(SRA)のようにRNA自体がコアクチベ一夕ーとして機能するものが存在する。RRMを持つCoAA及び、そのスプライシング異性体であり、転写抑制因子であるcoactivator modulator(CoAM)の解析のため、我々は、以下のような新たなin vivo及びin vitroタンパク-RNA結合実験を樹立した。1)in vivo免疫沈降タンパク-RNA結合アッセイ、2)磁力ビーズ結合ポリA-RNAを用いた、迅速タンパク-RNA結合アッセイ、3)発光タンパクであるルシフェラーゼによるmammalian three-hybrid assay、4)発光標識RNAによるin vitroタンパク-RNA結合アッセイ(Liquid Fluorescent RNA pull down assay)、5)in vitro GSTタンパク-RNA pull-downアッセイ。以上のアッセイ及び、既存の実験方法から次の新たな知見が得られた。(1)CoAAはin vivo及び、in vitroにおいて非特異的にRNAと結合する。(2)In vivo及び、in vitroでCoAAはRNA型コアクチベーターであるSRAと結合するとともに、転写を相乗的に活性化する。(3)CoAMはCBPにより活性化された転写を基底レベルまで抑制するが、このとき、histone acetyltransferase (HAT)活性も抑制される。(4)CoAAによる転写活性化及び、CoAMによる転写抑制はRRMの第1RRMを削除すると消失する。

In recent years, we have developed coactivator activators (CoAA) for RNA recognition motifs (RRM), RNA binding motifs, RNA recognition motifs, RNA recognition motifs, RNA recognition Steroid receptor RNA activator(SRA) is a functional RNA activator. RRM maintains CoAA and CoAM as well as coactivator modulator(CoAM) analysis and RNA binding in vivo and in vitro. 1)in vivo immunoprecipitation, 2) in vitro magnetic field binding, rapid magnetic field binding, 3) in vitro Fluorescent field binding, 4) in vitro fluorescent field binding, Liquid fluorescent RNA pull down assay, 5)in vitro fluorescent field binding, GST-RNA pull down assay. The above mentioned problems and problems, existing problems and new problems are solved. (1)CoAA binds to non-specific RNA in vivo and in vitro. (2)In In vivo and in vitro, CoAA is activated by RNA. (3)CoAM inhibits the activity of CBP, HAT and HAT. (4)CoAA is activated and CoAM is inhibited and RRM is eliminated.

项目成果

臨床分子内分泌学3 -甲状腺・副甲状腺・骨内分泌代謝系- I.甲状腺ホルモン 薬理作用と生理差量 脳の発達と機能維持に対する作用

临床分子内分泌学3 - 甲状腺、甲状旁腺和骨内分泌和代谢系统 - I. 甲状腺激素药理作用和生理差异对大脑发育和功能维持的影响

• 发表时间: 2005
• 期刊: 日本臨床(増刊10) 63
• 作者: 鯉淵典之;岩崎俊晴;宮崎航;岡田淳一;下川哲昭;竹下彰;黒田洋一郎;鯉淵典之
• 通讯作者: 鯉淵典之

Postnatal changes of steroid receptor coactivator-1 immunoreactivity in rat cerebellar cortex

• DOI: 10.1089/thy.2005.15.314
• 发表时间: 2005-04-01
• 期刊: THYROID
• 影响因子: 6.6
• 作者: Yousefi, B;Jingu, H;Koibuchi, N
• 通讯作者: Koibuchi, N

内分泌攪乱物質の甲状腺及び神経に対する影響.

内分泌干​​扰物对甲状腺和神经的影响。

• 发表时间: 2006
• 期刊: ホルモンと臨床 54
• 作者: 岩崎俊晴;鯉淵典之
• 通讯作者: 鯉淵典之

Neuronal expression of nuclear transcription factor MafG in the rat medulla oblongata after baroreceptor stimulation.

压力感受器刺激后大鼠延髓中核转录因子 MafG 的神经元表达。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Life Sci 78
• 作者: Kumaki I;Yang D;Koibuchi N;Takayama K.
• 通讯作者: Takayama K.

甲状腺ホルモンによる脳発達の調節機構と環境化学物質による修飾

甲状腺激素和环境化学物质修饰对大脑发育的调节机制

• 发表时间: 2006
• 期刊: 神経研究の進歩 50
• 作者: 鯉淵典之;下川哲昭;岩崎俊晴
• 通讯作者: 岩崎俊晴