下垂体、視床下部におけるホルモンによる転写活性変化の細胞単位での検索

逐个细胞寻找激素诱导的垂体和下丘脑转录活性变化

• 批准号: 07770838
• 负责人: 鯉淵 典之
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Dokkyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770838/
• 关键词: 甲状腺ホルモン; 下垂体; TSH; α-subunit; 小脳; cytochrome c oxidase; cloning; in situ hybridization

本研究の目的は、下垂体前葉、及び視床下部ニューロンの初代培養系、又は動物個体を用いて、遺伝子発現調節に及ぼすホルモンの作用を、甲状腺ホルモンの作用を中心として細胞単位で解析する事である。本年度は以下のような実験を行った。1)下垂体の初代培養系を用いた実験下垂体糖蛋白ホルモン(LH、FSH及びTSH)間で構造が全く同一のα subunit遺伝子について、それぞれの細胞における遺伝子発現に及ぼす甲状腺ホルモンの作用の違いを調べるため、下垂体の初代培養細胞を用いてα subunitのin situ hybridization (ISH)と、TSG、LH、及びFSHの免疫組織化学を同時に行った。その結果、TSH細胞のみで甲状腺ホルモンによってα subunit遺伝子発現の抑制が観察された。また、TSH分泌のみが甲状腺ホルモンによって抑制され、LH及びFSHの分泌は影響を受けなかった。(投稿準備中)2)視床下部及びその他の中枢神経系に関する実験中枢神経系に関しては当初の目的とやや異なった方向に研究が進んだ。c-erbAα2 mRNAの視床下部における局在を調べている過程(Endocrine J. 1995)で、甲状腺ホルモン受容体及びc-erbAα2遺伝子が中枢神経系のあらゆる部位に広範囲に発現する事がわかった。そこで、視床下部ニューロンばかりではなく、あらゆる神経細胞の遺伝子の発現に対し、甲状腺ホルモンがある種の普遍的な作用を持っているのではないかと考えた。しかし、視床下部はあまりにも多種類の細胞が混在して局在するため、この可能性を調べるためには適さないと考え、発生期の小脳を用いてdifferential plaque screeningにより甲状腺ホルモンによって発現が調節されている遺伝子の検索を行った。その結果、cytochrome c oxidase subunit I遺伝子をクローニングした(J. Neuroendocrinol. 1995)。現在、この遺伝子の発現が、視床下部を含めた脳内のどの部位でその時期に甲状腺ホルモンによって変化するのかをISHを用いて検索中である。

は の purpose this study, the anterior pituitary, and び bed bottom ニ ュ ー ロ ン の original training department, and individual を は animals with い て, but 伝 発 now adjust に and ぼ す ホ ル モ ン の を, thyroid ホ ル モ ン の role を center と し て cells 単 a で parsing す る matter で あ る. For the current year, the following ような practical experience を is った. 1) at the beginning of pituitary の generation training department を い た be 験 pituitary glycoprotein ホ ル モ ン (LH, FSH and び TSH) between で tectonic が く same の alpha Subunit posthumous son 伝 に つ い て, そ れ ぞ れ の cells に お け る heritage 伝 発 に now and ぼ す thyroid ホ ル モ ン の role の violations い を adjustable べ る た め, the next generation of cultured cells at the beginning of pituitary の を with い て alpha subunit の the in situ hybridization (ISH)と, TSG, LH, and びFSH <s:1> immunohistochemistry を simultaneously に line った. Youdaoplaceholder0 <s:1> results, TSH cells みで みで thyroid ホ モ モ モ によって によってα subunit 伝 showed <s:1> inhibition が観 observation された. ま た, TSH secretion の み が thyroid ホ ル モ ン に よ っ て inhibit さ れ, LH and び FSH secretion の は を by け な か っ た. Contribute (prepare) 2) depending on the lower part of the bed and び そ の he の central god 経 に masato す る be 験 central god 経 department に masato し て は の original purpose と や や different な っ た direction が に research into ん だ. C - erbA alpha 2 mRNA の depending on the bed bottom に お け る bureau in を adjustable べ て い る process で Endocrine j. (1995), thyroid ホ ル モ ン let body and び c - erbA alpha 2 sons survived 伝 が central god 経 is の あ ら ゆ る parts に hiroo van 囲 に 発 now す る matter が わ か っ た. そ こ で, depending on the bed bottom ニ ュ ー ロ ン ば か り で は な く, あ ら ゆ る god 経 cells の heritage 伝 son の 発 now に し seaborne, thyroid ホ ル モ ン が あ る の general な role を hold っ て い る の で は な い か と exam え た. し か し, depending on the bed bottom は あ ま り に も variety が の cells mixed with し て bureau in す る た め, こ の possibility を adjustable べ る た め に は optimum さ な い と え test, small 発 born period の 脳 を with い て differential plaque Screening に よ り thyroid ホ ル モ ン に よ っ て 発 now が adjust さ れ て い る posthumous son 伝 の 検 cable line を っ た. Youdaoplaceholder0 そ results, cytochrome c oxidase subunit I 伝 subunit を ロ ニ ニ グ グ た た(J. Neuroendocrinol. 1995). Now, こ の posthumous son 伝 の 発 が now, depending on the bed bottom を め た 脳 within の ど の parts で そ の period に thyroid ホ ル モ ン に よ っ て variations change す る の か を ISH を with い て 検 cable in で あ る.

项目成果

S. Tanaka, N. Koibuchi, H. Ohtake, T. Kawatsu, N. Tadokoro, T. Kumasaka, N. Inaba, S. Yamaoka: "Regional comparison of prolactin gene expression in human decidua during pregnancy" European Journal of Endocrinology. (in press). (1996)

S. Tanaka、N. Koibuchi、H. Ohtake、T. Kawatsu、N. Tadokoro、T. Kumasaka、N. Inaba、S. Yamaoka：“怀孕期间人类蜕膜催乳素基因表达的区域比较”《欧洲内分泌学杂志》。

N. Koibuchi, S. Matsuzaki, K. Ichimura, H. Ohtake, S. Yamaoka: "Effect of perinatal hypothyroidism on expression of cytochrome ooxidase subunit I gene which is cloned by differential plaque screening from the cerebellum of newborn rat" Journal of Neuroend

N. Koibuchi、S. Matsuzaki、K. Ichimura、H. Ohtake、S. Yamaoka：“围产期甲状腺功能减退症对通过新生大鼠小脑差异斑块筛选克隆的细胞色素氧化酶亚基 I 基因表达的影响”《Neuroend 杂志》

N. Tadokoro, N. Koibuchi, H. Ohtake, T. Kawatsu, S. Yamaoka, Y. Kato, T. Kumasaka: "Expression of prolactin gene in human decidua studied by in situ hybridization histochemistry" Endocrine Journal. 42. 537-543 (1995)

N. Tadokoro、N. Koibuchi、H. Ohtake、T. Kawatsu、S. Yamaoka、Y. Kato、T. Kumasaka：“通过原位杂交组织化学研究人类蜕膜中催乳素基因的表达”内分泌杂志。

N. Koibuchi, R. Konno, S. Matsuzaki, A. Niwa, S. Yamaoka: "Localization of D-amino-acid oxidase mRNA in the mouse kidney and the effect of testosterone treatment." Histochemistry and Cell Biology. 104. 349-355 (1995)

N. Koibuchi、R​​. Konno、S. Matsuzaki、A. Niwa、S. Yamaoka：“D-氨基酸氧化酶 mRNA 在小鼠肾脏中的定位以及睾酮治疗的效果。”

N. Koibuchi, S. Yamaoka, M. Suzuki: "In situ hybridization histochemistry of c-erbAa2 mRNA in the hypothalamus and its surrounding structures in the adult male rat." Endocrine Journal. 42. 49-55 (1995)

N. Koibuchi、S. Yamaoka、M. Suzuki：“成年雄性大鼠下丘脑及其周围结构中 c-erbAa2 mRNA 的原位杂交组织化学。”