下垂体、視床下部におけるホルモンによる転写活性変化の細胞単位での検索

逐个细胞寻找激素诱导的垂体和下丘脑转录活性变化

• 批准号: 05770777
• 负责人: 鯉淵 典之
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Dokkyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770777/
• 关键词: 視床下部; 下垂体; 遺伝子発現; 免疫組織化学; 初代培養; in situ hybridization; 甲状腺ホルモン; テストステロン

本研究の目的は、下垂体前葉細胞及び視床下部ニューロンの初代培養系及び動物個体を用いて、遺伝子発現調節に関与するホルモン作用(甲状腺ホルモンを中心として)の解析を細胞単位で行うことである。今年度、同テーマによる研究の結果、申請者は、下垂体前葉及び視床下部の無血清培地を用いた初代培養系を確立した。そして、視床下部の培養細胞では、視交叉上核より採取した細胞をにおいて、免疫組織化学的にvasopressin、VIP、somatostatinの発現を同定し、このうち、vasopressinが約24時間周期で拍動的に分泌している事を報告した。下垂体の培養細胞ではTSHbeta subunitの発現をin situ hybridizationによって同定し、この発現が甲状腺ホルモンによって直接調節されている事を報告した。現在、これらの培養系を用いて、リポソームを使い、細胞内への遺伝子の導入を試みている。動物個体を用いた実験では、室傍核小細胞区域において甲状腺を摘除する事によってc-erbAa2遺伝子の発現が上昇し、甲状腺ホルモンを補充する事によってこの上昇は抑えられる事を確認した。また、種々の組織において細胞の可塑性に関与するといわれているオルニチン脱炭酸酵素(ODC)遺伝子の発現がテストステロンの投与によって投与から約14時間後にマウス近位尿細管曲部において増加することを免疫組織化学、in situ hybridizationにより確認した。引き続き、甲状腺機能変化と共にODCが下垂体、視床下部においても変化するのではないかと考え、実験を行ったが発現量が低く、細胞を特定することができなかった。

The purpose of this study is to analyze the position of the anterior cells of the pituitary gland, the anterior cells of the pituitary gland and the lower part of the bed, the primary culture system and the animals. This year, the results of the study, the applicants, the anterior pituitary gland and the lower part of the bed were serum-free. Cell culture, cell culture in the lower part of the bed, cell culture in the superior nucleus of the visual chiasma, vasopressin, VIP and somatostatin in immunocytochemistry showed the same activity in the 24-hour cycle of cell culture, cell culture and vasopressin. The pituitary gland, TSHbeta subunit, in situ hybridization, thyroid, thyroid, At present, it is necessary to use the drugs, the cells, and the cells. In the animal body, the small cell area of the paraventricular nucleus, the paraventricular area, the The cell plasticity test and the ODC enzyme assay were used to detect the enzyme activity in the proximal urethral tube. after 14 hours, the proximal urethral tube was detected by immunocytochemistry and immunohisto-chemistry. The ODC and thyroid organs can be used to treat the pituitary gland, the lower part of the bed, the pituitary gland, the lower part of the bed, the lower part of the bed and the lower part of the bed.

项目成果

K.Watanabe,N.Koibuchi,H.Ohtake and S.Yamaoka: "Circadian rhythms of vasopression release in primary cultures of rat suprachiasmatic nucleus." Brain Research. 624. 115-120 (1993)

K.Watanabe、N.Koibuchi、H.Ohtake 和 S.Yamaoka：“大鼠视交叉上核原代培养物中血管加压释放的昼夜节律”。

N.Koibuchi,S.Matsuzaki,M.Saaki,H.Ohtake and S.Yamaoka: "Heterogeneous expression of ornithine decarboxylase gene in the mouse kidney following testosterone treatment." Histochemistry. 100. 325-330 (1993)

N.Koibuchi、S.Matsuzaki、M.Saaki、H.Ohtake 和 S.Yamaoka：“睾酮治疗后小鼠肾脏中鸟氨酸脱羧酶基因的异质表达。”

N.Koibuchi,S.Matsuzaki,H.-T.Ma,M.Sakaki and S.Yamaoka: "Induction of ornithine decarboxylase immunoreactivity in the male mouse kidney following testosterone treatment:An axial heterogeneity in the proximal tubule." J.Endocrinology. 136. 85-89 (1993)

N.Koibuchi、S.Matsuzaki、H.-T.Ma、M.Sakaki 和 S.Yamaoka：“睾酮治疗后雄性小鼠肾脏中鸟氨酸脱羧酶免疫反应性的诱导：近端小管中的轴向异质性。”

鯉淵典之,大竹英樹,山岡貞夫: "TRHによる下垂体初代培養細胞TSHbeta subunit遺伝子発現の変化" 神経化学. 32. 552-553 (1993)

Noriyuki Koibuchi、Hideki Otake、Sadao Yamaoka：“TRH 导致原代培养垂体细胞中 TSHbeta 亚基基因表达的变化”《神经化学》32. 552-553 (1993)。

N.Koibuchi,R.B.Gibbs,K.E.Jones,S.Yamaoka,W.W.Chin,D.W.Pfaff and M.Suzaki: "Increase in c-erbAa2 mRNA in the parvocellular region of the paraventricular nucleus of the hypothalamus following thyoridectomy in the adult male rat." Neurosci.Lett.164. 159-162

N.Koibuchi、R​​.B.Gibbs、K.E.Jones、S.Yamaoka、W.W.Chin、D.W.Pfaff 和 M.Suzaki：“成年雄性大鼠甲状腺切除术后下丘脑室旁核细小细胞区域的 c-erbAa2 mRNA 增加。