カーボンナノチューブセンサーによる肝特異的酸化リポ蛋白の測定

使用碳纳米管传感器测量肝脏特异性氧化脂蛋白

• 批准号: 17659397
• 负责人: 千葉 仁志
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659397/
• 关键词: 酸化リボ蛋白; 肝不全; モノクロナル抗体; カーボンナノチューブ; 酸化リポ蛋白

肝不全患者血清から超遠心法とゲルろ過法により分離した肝特異的酸化リボ蛋白をマウスに免疫し、ハイブリドーマを作製し、同リボ蛋白に対する抗体を産生するクローン数個を得た。そのうち、金属酸化LDLや正常LDLとは反応しない抗体を産生するクローン1個を選択した。本クローンの抗体は肝不全患者LDL画分と強く反応したが、正常者や高脂血症患者ではほとんど反応せず特異性に優れていた。また、同リボ蛋白をウサギに免疫して抗血清を得た。本ポリクロナル抗体を親和性クロマトグラフィーにより精製した特異抗体は、同モノクロナル抗体とのサンドイッチ酵素免疫測定にも応用でき、肝不全患者で著しく高い反応を示した。また、胆汁うっ滞患者や中等度の肝不全患者でも反応がみられ、肝特異的酸化リボ蛋白の出現する病態に関して示唆を得ることができた。一方、本モノクロナル抗体をカーボンナノチューブセンサーへと組み込むことについては、抗体遺伝子の可変領域遺伝子cDNAをクローニングし、さらに発現ベクターへと組み込むことにより、抗体を大量に調製することができるようになった。同抗体をカーボンナノチューブセンサーの検出基板のバックゲートに固定化したところ、肝特異的酸化リボ蛋白と迅速に反応し、高感度の検出が可能であった。以上から、肝特異的酸化リボ蛋白に対するカーボンナノチューブセンサーによる測定の基本的検討は完了し、今後は実用化に向けた研究を行う予定である。

The serum samples of patients with liver insufficiency were separated from the acidified protein of liver failure by heart test, the acidified protein of the liver, the immune response of the liver, the antibody of the same protein, and the antibody of the same protein were isolated from several samples. Metal acidified LDL, normal LDL, antisera, antisera. The LDL scores of patients with liver insufficiency and normal patients with hyperlipidemia were significantly higher than those of patients with hyperlipidemia. The antiserum was obtained by immunizing with the same protein. In this study, antibodies and sexual antibodies were detected in patients with liver insufficiency and liver insufficiency. The patients with moderate degree of liver insufficiency, the patients with moderate liver insufficiency, the acidified protein of liver disease, the symptoms of disease, the symptoms of liver disease, the symptoms of liver disease, bile stagnation, moderate degree of liver insufficiency, moderate degree of liver insufficiency, and acidification of liver disease. On the one hand, the local antibody system, the antibody system, the antibody group, the antibody group and the antibody group. With the same antibody, the substrate was immobilized, the acidified protein of the liver was quickly reversed, and the high sensitivity was detected. The above acidified protein, protein

项目成果

Evaluation of risk for atherosclerosis in Alagille syndrome and progressive familial intrahepatic cholestasis: Two congenital cholestatic diseases with different lipoprotein metabolisms

• DOI: 10.1016/j.jpeds.2004.10.047
• 发表时间: 2005-03-01
• 期刊: JOURNAL OF PEDIATRICS
• 影响因子: 5.1
• 作者: Nagasaka, H;Yorifuji, T;Kobayashi, K
• 通讯作者: Kobayashi, K

Improved HPLC assay for lipid peroxides in human plasma using the internal standard of hydroperoxide

• DOI: 10.1007/s11745-005-1412-2
• 发表时间: 2005-05-01
• 期刊: LIPIDS
• 影响因子: 1.9
• 作者: Hui, SP;Murai, T;Kurosawa, T
• 通讯作者: Kurosawa, T

Depletion of high-density lipoprotein and appearance of triglyceride-rich low-density lipoprotein in a Japanese patient with FIC1 deficiency manifesting benign recurrent intrahepatic cholestasis

• DOI: 10.1097/mpg.0b013e3180331df9
• 发表时间: 2007-07-01
• 期刊: JOURNAL OF PEDIATRIC GASTROENTEROLOGY AND NUTRITION
• 影响因子: 2.9
• 作者: Nagasaka, Hironori;Chiba, Hitoshi;Kobayashi, Kunihiko
• 通讯作者: Kobayashi, Kunihiko