ES細胞を用いた歯および歯周組織の再生法の開発

使用ES细胞开发牙齿和牙周组织再生方法

• 批准号: 17659656
• 负责人: 吉江 弘正
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659656/
• 关键词: ES細胞; 歯胚; 骨髄細胞

1.分化誘導したES細胞と歯上皮を接合させて歯胚を作成する。マウスES細胞から樹立した神経堤細胞様クローンNCSCD4と歯の形成能を有する胎生11.5日のマウス下顎上皮を2日間共培養した後、マウス腎皮膜下に移植し、移植14日後に移植組織を解析した。骨軟骨組織などが形成されたが歯胚組織は形成されなかった。そこで、笹井らの方法によりES細胞から神経堤細胞を分化誘導し、この細胞と胎生11.5日の下顎上皮を2日間共培養した後、腎皮膜下に移植した。移植14日後に移植組織を解析したが、骨軟骨組織などが形成されたものの歯胚組織は形成されなかった。そこで、ES細胞から分化誘導した神経堤細胞の密度を高める種々の工夫をして下顎上皮と共培養したが、年度内に歯胚組織の作成成功には至らなかった。2.歯間葉と口腔粘膜上皮を接合させて歯胚を作成する方法を開発する。分化誘導したES細胞と歯上皮を接合させて歯胚を作成することができなかったので、研究計画を一部変更して、歯の形成能を有するとされる胎生12.5日のマウス下顎歯間葉組織と種々の日齢の口蓋粘膜上皮組織を接合させ、2日間共培養した後、マウス腎皮膜下に移植した。14日後に移植組織に歯胚が形成されるか調べたところ、生後2日齢までの口蓋粘膜上皮組織を用いると歯胚が形成されるが、それ以後の口蓋粘膜上皮組織では歯胚が形成されないことが判明した。そこで、口蓋粘膜上皮細胞を1週間培養し、胎生12.5日のマウス下顎歯間葉組織と接合させて、口蓋粘膜上皮組織と同様の方法で歯胚の作成を試みたところ、生後4週齢までのマウスから単離・培養した口蓋粘膜上皮細胞で歯胚が形成された。この結果により、ES細胞から胎生12.5日のマウス歯間葉組織を分化誘導できれば、歯上皮の細胞は生後4週齢の培養口蓋粘膜上皮細胞を用いても歯胚を作成することが可能であることが示された。

1. Differentiation induction of ES cells and epithelial conjugation and preparation of embryos. MASES cells are established and the cells are established and the cells are formed. NCSCD4 cells are formed and the ability is established. They are viviparous for 11.5 days. The mandibular epithelium was co-cultured for 2 days, the subcutaneous renal transplantation was performed, and the transplanted tissue was analyzed 14 days after transplantation. The formation of osteochondral tissue is the formation of embryonic tissue. The methods of Sakai and Sakai are based on the differentiation induction of ES cells and Shinto cells, the co-cultivation of the mandibular epithelium for 11.5 days after birth, and the subcutaneous transplantation of kidneys. 14 days after transplantation, the transplanted tissue was analyzed and the osteochondral tissue was analyzed and the embryonic tissue was formed. Differentiation induction of ES cells The mandibular epithelium was co-cultured, and the embryonic tissue was successfully produced within the year. 2. The connection between the mesenchyme and the oral mucosa epithelium is the same as the method of making the embryo. Differentiation induction of ES cells and epithelial conjugation of embryos and production of ES cellsきなかったので, research project を一変 updated して, 歯の Formation Energy を有するとされAfter 12.5 days of birth, the mandibular mesenchymal tissue and the oral mucosal epithelial tissue were joined together, and after 2 days of co-culture, the kidney subcutaneous transplantation was performed. After 14 days, the transplanted tissue is used to form the embryonic embryo and the oral mucosal epithelial tissue is used after 2 days after birth. It is clear that the oral mucosal epithelial tissue of the oral cavity after the embryo is formed is not formed.そこで, Oral mucosal epithelial cells were cultured for 1 week, viviparous 12.5 days of mandibular mesenchymal tissue, and oral mucosal epithelial tissue were the same様のMethods: Embryos are produced and tested, and 4 weeks after birth, the embryos are isolated and cultured.このRESULTS により、ES cells からviviparous 12.5 days のマウス歯differentiation induction of mesenchymal tissue できれば、歯epithelial cells The oral mucosal epithelial cells were cultured 4 weeks after the cells were born and the embryos were used to prepare the cells.