赤外レーザ顕微鏡を利用した線虫表皮発生の研究

红外激光显微镜研究线虫表皮发育

• 批准号: 18657069
• 负责人: 高木 新
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18657069/
• 关键词: 赤外レーザ; C. elegans; セマフォリン; 形態形成; C.elegans

本研究の目的は、遺伝子発現用赤外レーザ顕微鏡を利用して、線虫C. elegans個体において特定の時期に狙った単一の細胞で熱ショックプロモーター下の目的の遺伝子を発現させることによって、細胞形態・運命制御因子の発生過程での機能を解析することである。陰門前駆細胞(VPC)でのセマフォリンのreverse signalの検討、および表皮細胞での異所的遺伝子発現誘導によるseam cell細胞極性決定に関わるWnt signalの同定を試み、以下の結果を得た。1)sm-1、plx-1のモザイク状発現誘導による両遺伝子のVPCにおける機能の解析。ショックプロモーターhsp-16.2下にsmp-1 cDNAを結合したプラスミドを、hsp-16.2::gfpとともC. elegansに導入した系統を用いて実験を行った。smp-1変異の遺伝学的背景で2個の隣接するVPCに野生型smp-1遺伝子産物を発現させると、両者の間の細胞伸長の不停止(overlapping)表現型が救済され、隣接する2細胞双方にセマフォリンシグナルが伝わることが細胞の伸長停止に十分であることが確認された。さらに、このときSMP-1の細胞内領域全体は伸長停止に不必要であることが明らかになった。昨年度の結果と合わせて以上の結果はSMP-1からのreverse signalが存在しない、もしくは、存在してもVPC伸長停止には必要ないことを支持している。2)Wnt遺伝子の異所発現による幼虫表皮細胞の極性決定機構の解析。昨年度に作成したWnt cDNAをC. elegans熱ショックプロモーターhsp-16.2下に結合したトランスジーンを持つ形質転換体を用いて、実験を行った。L2-L3幼虫の単一seam cellでmom-2とcwn-2とをそれぞれ発現させ、その後の隣接する細胞の発生を検討したが、顕著な異常は認められなかった。

The purpose of this study is to develop a novel method for detecting the presence of C. elegans individuals at specific time points in a cell, heat transfer, target gene development, cell morphology, fate control factor development and function analysis. The reverse signal detection of VPC cells and the isostatic determination of Wnt signal were studied. The results were as follows. 1) Analysis of VPC function of sm-1 and plx-1 in VPC system. smp-1 cDNA was synthesized under hsp-16.2:: gfp and C. elegans In the background of smp-1 gene differentiation, two adjacent VPC wild-type smp-1 gene products were detected, and two cell elongation overlapping phenotypes were identified. The whole intracellular domain of SMP-1 is elongated and stopped unnecessarily. Last year's results were combined with the above results: SMP-1 reverse signal was present, VPC extension was stopped, and support was needed. 2) Analysis of polarity-determining mechanisms in larval epidermal cells during the development of Wnt gene. Wnt cDNA was created last year. elegans heat exchanger hsp-16.2 to maintain the quality of the body to use, implementation L2-L3 larvae single seam cell, mom-2, cwn-2, and so on.

项目成果

Improved method for visualizing cells revealed dynamic morphological changes of ventral neuroblasts during ventral cleft closure Caenorhabditis elegans

改进的细胞可视化方法揭示了腹侧裂闭合过程中腹侧神经母细胞的动态形态变化

• 发表时间: 2007
• 期刊: Dev Growth Diffe Jan;49(1)
• 作者: Liu Z;Nukazuka A;Takagi S
• 通讯作者: Takagi S

The plexin PLX-2 and the ephrin EFN-4 have distinct roles in MAB-20/Semaphorin signaling in C. elegans morphogenesis.

丛蛋白 PLX-2 和肝配蛋白 EFN-4 在线虫形态发生的 MAB-20/Semaphorin 信号传导中具有不同的作用。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Genetics 176
• 作者: Nakao;F.;Hudson;M.L.;Suzuki;M.;Peckler;Z.;Kurokawa;R.;Zhicen;L.;Gengyo-Ando;K.;Nukazuka;A.;Fujii;T.;Suto;F.;Shibata;Y.;Shioi;G.;Fujisawa;H.;Mitani S.;Chisholm;A. D. & Takagi;S.
• 通讯作者: S.

Efficient laser-induced gene expression in C. elegans.

在线虫中激光诱导的高效基因表达。

• 发表时间: 2007
• 作者: Suzuki;M.;Kamei;Y.;Oda;Y.;Yuba;S. & Takagi;S.
• 通讯作者: S.

Semaphorin-Plexin signal controls epidermal ray morphogenesis by stimulating mRNA translation via eIF2alphain C. elegans.

Semaphorin-Plexin 信号通过线虫中的 eIF2alpha 刺激 mRNA 翻译来控制表皮射线形态发生。

• 发表时间: 2007
• 作者: Nukazuka;A.;Chikuma;M.;Fujisawa;H.;Inada;T.;Oda;Y. & Takagi;S.
• 通讯作者: S.

赤外レーザ顕微鏡による線虫C.elegans単一細胞での遺伝子発現誘導

使用红外激光显微镜诱导秀丽隐杆线虫单细胞中的基因表达

• 发表时间: 2007
• 作者: 鈴木基史;亀井保博;小田洋一;弓場俊輔;高木新
• 通讯作者: 高木新