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ゲノム・ポストゲノムリソースを利用したトマトの二次代謝産物トランスポーターの解析

利用基因组和后基因组资源分析番茄次生代谢转运蛋白

基本信息

批准号：
18658010
负责人：
白武勝裕
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

植物において二次代謝産物の分泌・蓄積やホルモンの輸送に関わるABC輸送体に着目し,トマトのポストゲノムリソースを利用することにより,園芸作物におけるABC輸送体の機能を明らかにすることを目標とした.1, トマトABC輸送体遺伝子のクローニングと生化学的性質の解析かずさDNA研究所のESTリソースから得た10種のABC輸送体cDNAクローンのうち,3種は完全長であったが,7種は5'または3'領域が欠けており,このうちの2種の完全長cDNAをRT-PCRまたはRACE法によりクローニングした.完全長の得られた5種のABC輸送体の器官別およびストレス処理時における遺伝子発現を,リアルタイムPCR法により調べた.その結果,アントシアンなどの二次代謝産物の輸送に関わることが予想されるSlMRP1の発現が成熟果実で顕著に高いこと,テルペノイドなどの二次代謝産物の輸送を担うことが予想されるSlPDR1の発現は果実の成長期間を通して比較的高いこと,また,オーキシンを輸送することが予想されるSlMDR1が着果直後の果実で顕著に高いことが明らかとなった.一方,ワックスの輸送に関わることが予想されるSlWBC1およびSlWBC2の発現はどの器官でも比較的恒常的であった.2,ABC輸送体の形質転換体の作出果実の成長期間を通して比較的発現が高かく,テルペノイドなどの二次代謝産物の輸送を担うことが予想されるSlPDR1の発現を,RNAiにより抑制した形質転換トマトを作出したところ,葉の表面に多量の分泌物が確認された.現在,その二次代謝産物の組成を野生型と比較し,SlPDR1の輸送基質の推定を進めている.

The secretion, accumulation and transportation of secondary metabolites in plants are related to ABC transporters. The functions of ABC transporters in garden crops are clearly indicated. DNA Research Institute's EST library has identified 10 ABC transporter cDNA libraries, 3 complete length, 7 5'complete length, 2 complete length cDNA libraries by RT-PCR RACE. 5 ABC transporters were obtained by PCR method. As a result, the development of SlDRP1 in mature fruit was significantly higher than that of SlDRP1 in growth period. The result of the test is that the number of patients who have been treated for the first time is higher than the number of patients who have been treated for the second time. On the one hand, the transport of protein is related to the development of SLWBC1 and SLWBC2, which are relatively constant. On the other hand, the development of ABC transporter is relatively high, and the transport of secondary metabolites is related to the development of SLPDR1, which is inhibited by RNAi. A large amount of secretion from the leaf surface was identified. Now, the composition of secondary metabolites of SlPDR1 was compared with wild type, and the transport matrix of SlPDR1 was estimated.