レドックス調節による網膜光障害抑制機構の解析、及び臨床応用のための基礎研究

氧化还原调节抑制视网膜光损伤的机制分析及临床应用基础研究

• 批准号: 03J04823
• 负责人: 谷戸 正樹
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J04823/
• 关键词: 網膜光障害; 過酸化脂質; 酸化ストレス; 神経保護; アポトーシス; 網膜電図; 4-ヒドロキシノネナール; 4-ヒドロキシヘキセナール; チオレドキシン; 網膜色素上皮細胞; スルフォラファン; ゲラニルゲラニルアセトン; 視細胞

1,網膜光障害モデルにおける、脂質過酸化マーカーhydroxyoctadecadienoic acid(HODE)、(8-iso-prostaglandin F2a 8-iso-PGF2a)の検出。(1)白色マウスに5000ルクス、2時間の白色光照射を行った。(2)光照射後96時間目まで、経時的に眼球を摘出し、ガスクロマトグラフィーで、網膜内のHODE、8-iso-PGF2aを検出した。(3)光照射24時間目に、有為なHODE、8-iso-PGF2aをの上昇が観察された。(4)HODE、8-iso-PGF2aをは、生体で有効な新規網膜障害マーカーである。2,網膜光障害における酸化修飾蛋白質の検出及び同定。(1)暗環境下で飼育した白色ラットに5000ルクス3時間の白色光を照射した。(2)光照射後48時間目まで経時的に眼球摘出し、網膜組織内でのアルデヒド修飾蛋白質量を、抗4-ヒドロキシノネナール、抗4-ヒドロキシヘキセナール抗体を用いたドットブロットウェスタンで解析した。(3)光照射直後より、網膜あるいは網膜色素上皮において、修飾蛋白質量の上昇した。(4)免疫組織染色によって、修飾蛋白質の蓄積が見られた網膜部位は、後のアポトーシス、あるいは細胞脱落部位と一致した。(5)網膜サンプルを2次元電気泳動で展開し、抗4-ヒドロキシノネナール抗体を用いたウェスタンブロットを行い、ペプチドマスフィンガープリントの手法で、光照射によって、酸化修飾を受ける蛋白質を同定した。(6)同定された蛋白質には、主として、エネルギー代謝、シャペロン、核酸代謝、フォトトランスダクションに関わる蛋白質が含まれていた。(7)アルデヒドによる、蛋白質の修飾が、網膜光障害の惹起に関わる分子機構である可能性が示唆された。

1. The net light barrier is harmful to the production of hydroxyoctadecadienoic acid (HODE), 8-iso-prostaglandin F2a 8-iso-PGF2a (F2a). (1) White light is used for 5000 hours, and white light is irradiated for 2 hours. (2) 96 hours after illumination, the eyeballs were extracted, the eyeballs were extirpated, and the HODE and 8-iso-PGF2a were detected in the network. (3) when the light is irradiated for 24 hours, it will be used for the observation of HODE and 8-iso-PGF2a. (4) HODE, 8-iso-PGF2a virus, and health products are affected by new network disorders. 2. Net photodamage, acidification, protein release and homology. The main results are as follows: (1) in the dark environment, the white light will be exposed to white light in the dark environment for 5000 minutes. (2) the enucleation of eyeball at 48 hours after light exposure, the amount of protein in the network tissue, anti-4-receptor antibody and anti-4-receptor antibody were analyzed by scanning electron microscope. (3) after direct exposure to light, the membrane pigment epithelium was detected, and the amount of protein was increased. (4) Immunohistochemical staining and protein repair were used to determine the location of the network, the location of the exfoliated cells and the location of the exfoliated cells. (5) the two-dimensional swimming exercise of the network template is unfolded, and the anti-4-cell antibody is used to detect the antibody. The antibody is used to detect the antibody, the antibody is used to detect the protein, the light irradiation device is used, and the acidizing agent is subject to the same protocol. (6) homology of protein, nucleic acid, protein and protein. (7) the possibility of instigation in molecular institutions caused by the damage of protein, protein, and net film light barrier is indicated.

项目成果

Masaki Tanito: "Enhanced oxidative stress and impaired thioredoxin expression in spontaneously hypertensive rats."Antioxidants & Redox Signaling. 6・1. 89-97 (2004)

Masaki Tanito：“自发性高血压大鼠氧化应激增强和硫氧还蛋白表达受损。”抗氧化剂和氧化还原信号传导6·1（2004）。

Cytoprotective Effects of Geranylgeranylacetone against Retinal Photooxidative Damage

• DOI: 10.1523/jneurosci.4866-04.2005
• 发表时间: 2005-03
• 期刊: The Journal of Neuroscience
• 作者: M. Tanito;Yongwon Kwon;N. Kondo;J. Bai;H. Masutani;Hajime Nakamura;J. Fujii;A. Ohira;J. Yodoi

Detection of peroxidation in light-exposed mouse retina assessed by oxidative stress markers, total HODE and 8-isoPGF2α.

通过氧化应激标记物、总 HODE 和 8-isoPGF2α 评估曝光小鼠视网膜中的过氧化情况。

• 期刊: Neuroscience Letters (印刷中)
• 作者: Masaki Tanito