腸管上皮に発現する新奇カプサイシン受容体の栄養科学的活用

肠上皮表达的新型辣椒素受体的营养科学利用

• 批准号: 18658052
• 负责人: 田中 俊之
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18658052/
• 关键词: カプサイシン; 受容体; 機能構造解析; 生理活性; タンパク質

トウガラシの辛み成分であるカプサイシンは、ヒト大腸癌由来の培養上皮細胞であるCaco-2細胞に作用し、そのタイトジャンクションを一時的に開放する作用を持つ。タイトジャンクションは、細胞間隙からの物質の透過吸収を制御しているため、腸管からの栄養吸収の制御剤としてカプサイシンを利用することが可能である。しかし、このカプサイシンによるタイトジャンクション開放のメカニズムは全くわかっていない。そこで、本研究では、Caco-2細胞に発現しているカプサイシン受容体をタイトジャンクション開放の開始点と考え、その構造機能解析とアッセイ系への活用を目的としている。今年度は、昨年度に引き続き、カプサイシン受容体のN末端細胞質領域にターゲットを絞り、その大量発現と精製を行い、核磁気共鳴(NMR)解析や結晶化などの構造解析を進めた。また、このN末端細胞質領域に含まれるアンキリンリピートドメインを固定化した樹脂を作製し、このドメインと相互作用するタンパク質や低分子化合物の単離・同定を検討している。一方、昨年度に引き続き、カプサイシン処理→カルシウムの流入→コフィリンの脱リン酸化→タイトジャンクションの開放という分子機構をより詳細に理解すべく、コフィリンのトランスフェクタントを用いた生理学的解析を行った。その結果、カプサイシン処理によってコフィリンの脱リン酸化が引き起こされ、更にタイトジャンクションタンパク質の分布やFアクチンの構造が変化することでタイトジャンクションが開放されることが明らかとなった。

Caco-2 cells from cultured epithelial cells derived from colorectal cancer have been shown to function as a temporary open-source. It is possible to utilize the absorption control agent of the substance passing through the cell gap and the absorption control agent of the intestinal tract. The first is to open the door to the first floor of the building. In this study, the development of Caco-2 cells was studied, and the structure and function of Caco-2 cells were analyzed. This year, the N-terminal cytoplasmic domain of the receptor was analyzed by nuclear magnetic resonance (NMR) and structural analysis. In addition, the resin used to immobilize the N-terminal cytoplasmic region containing the Ancline ligand was prepared, and the separation and identification of the ligand and low-molecular compounds that interact with the ligand were discussed. A detailed understanding of the physiological analysis of the molecular mechanism of the molecular structure of the molecular structure. As a result of this, the process of dechlorination and acidification has been initiated, and the distribution of the quality of the dechlorination and the structure of the dechlorination have been changed.

项目成果

Capsaicin induces cofilin dephosphorylation in human intestinal cells: The triggering role of cofilin in tight-junction signaling

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2007.02.002
• 发表时间: 2007-04-06
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Nagumo, Yoko;Han, Junkyu;Tanaka, Toshiyuki
• 通讯作者: Tanaka, Toshiyuki

Cofilin mediates tight-junction opening by redistributing actin and tight-junction proteins

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2008.10.071
• 发表时间: 2008-12-19
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Nagumo, Yoko;Han, Junkyu;Tanaka, Toshiyuki
• 通讯作者: Tanaka, Toshiyuki