non-codingRNAによる心筋イオンチャネル発現制御
非编码RNA调控心肌离子通道表达
基本信息
- 批准号:18659223
- 负责人:
- 金额:$ 2.05万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
- 财政年份:2006
- 资助国家:日本
- 起止时间:2006 至 2007
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
病態心でのイオンチャネルリモデリングは、胎児型イオンチャネル遺伝子の再発現によると現在考えられている。Non-coding RNAは遺伝子発現を制御するあらたな分子として注目されている。今回の実験では,蛋白質をコードしていないnon-coding RNAによる転写制御に注目し、胎生9.5日齢、18日齢、成熟マウスの心室筋のnon-coding RNAの発現解析を行った。前年度において蛋白翻訳を制御するnon-coding RNAであるmicro RNAに注目し、胎生9.5日齢、18日齢、成熟マウスの心室筋におけるmicro RNAをマイクロアレイ法を利用し各発達段階での発現量をスクリーニングし、胎児心筋と成熟心筋ではmicro RNAの発現量に大きな差がある遺伝子をいくつか見つけた。その中から,リモデリングによる不整脈発生に寄与しているT型カルシウムチャネルやHCNチャネルなどを制御していると推定されるmicro RNAをTaqMan microRNA assayにより定量した。その結果、マイクロアレイで差がみられたmicro RNAは、胎児心筋と成熟心筋で発現量が異なることが証明された。さらに、この中からギャップ結合蛋白であるコネキシン43を制御すると推定されるmicro RNAをマウスの新生児心筋に遺伝子導入することにより、micro RNAの転写制御が機能的変化を引き起こすかを目的とし以下の実験を行った。特定のmcro RNAを阻害する阻害物質、逆に細胞内の特定micro RNAレベルをアップレギュレートする合成micro RNA分子をエレクトロポレーション法、及びリポフェクタミン法によりマウス新生児心筋に導入後培養して、形態的変化とコネキシン43蛋白の発現を調べた。コネキシン43発現を免疫染色法及びウェスタンブロッティング法により検討したが、今回導入したmicro RNAによる蛋白の発現制御は観察されなかった。
The heart is sick, the baby is sick, the baby is sick. The Non-coding RNA is now responsible for the control and control of the molecules. This time, the egg whites, the protein, the protein, the non-coding RNA, the birth, the birth, the ventricular tendon, the non-coding RNA, the birth, the ventricular tendon, the heart muscle, the heart, the In the previous year, non-coding RNA protein flip was used to control the development of micro RNA, fetal 9.5 days, 18 days, mature ventricular tendons, ventricular tendons, micro RNA tendons, heart rate, fetal heart rate and fetal heart rate. In the middle of the day, there is a problem that an irregularity has been sent to the student. It has been sent to you in the form of HCN, TaqMan microRNA assay, presumption, TaqMan microRNA assay, quantity, etc. The results of the test, the results, the results and the results. In this paper, the combination of protein and protein is used in this paper. It is presumed that there is a new problem in the heart of the micro RNA machine, and that the micro RNA system can be used to improve the performance of the machine. Specific mcro RNA blocks specific micro RNA molecules, induces specific micro RNA molecules, induces the synthesis of micro RNA molecules, induces the formation of new tendons, induces the formation of new tendons, and induces the formation of 43 proteins. The immunostaining method and the immunostaining method were used in this experiment. The micro RNA protein was added this time.
项目成果
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