7SK-RNAを沈降する新たな自己抗体に関する研究

一种沉淀7SK-RNA的新型自身抗体的研究

基本信息

批准号：
18659292
负责人：
三森経世
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659292/
关键词：
7SK-RNA P-TEFb HEXIM1 自己抗体自己免疫疾患免疫沈降法 79K-RNA 自己杭体

项目摘要

膠原病を中心とする全身性自己免疫疾患には自己細胞成分と反応する多彩な自己抗体が検出される.これらの自己抗体は臨床像と密接に関連し,診断,病型分類,予後推定など臨床的な有用性が高い.一方,自己抗体の対応抗原(自己抗原)は生命現象に必須の酵素や調節因子であることが明らかにされてきた.申請者は7SK-RNAを沈降する新たな自己抗体を見出し,昨年度までにこの抗体が7SK-RNAに結合する35kDa蛋白を抗原エピトープとすることを示した.本研究では,この7SK-RNAを沈降する自己抗体の真の対応抗原を同定し,自己免疫疾患における意義を検討することを目的とした.1.7SK-RNA結合蛋白をコードするcDNAのクローニング:昨年度までの検討で,申請者らは7SK-RNAを免疫沈降する患者血清の多くが,共通する35kDa蛋白を認識することを見出した.そこで,HeLa細胞mRNA由来・gtll cDNAライブラリーを用い,7SK-RNA沈降患者血清をプローブに用いて自己抗体が認識する蛋白成分のcDNAクローニングを試みた.いくつかの候補cDNAが選択され,cDNAより大腸菌に発現させた融合蛋白よりアフィニティ精製した患者血清IgGは,HeLa細胞抽出物から7SK-RNAを免疫沈降することを確認した.2.抗7SK-RNP抗体の臨床的意義の検討:年度内に受診した約500例の新たな膠原病およびその疑い患者の血清を用いて,RNA免疫沈降法およびRT-PCR法で7SK-RNAを免疫沈降する患者血清を新たに5例確認した.これらの患者は関節リウマチおよびシェーグレン症候群の患者であった.以前の10例の陽性患者と総合し,本抗体は関節リウマチとシェーグレン症候群に見いだされる自己抗体であることが推定された。

在系统性自身免疫性疾病（主要是胶原蛋白疾病）中检测到与自动细胞成分反应的各种自身抗体。这些自身抗体与临床特征密切相关，并且具有较高的临床实用性，例如诊断，疾病类型分类和预后。同时，自身抗体的相应抗原（自身抗原）已显示为生命现象必不可少的酶和调节剂。申请人发现了一种沉淀7SK-RNA的新自身抗体，到去年，这种抗体与7SK-RNA 35KDA结合，我们已经表明蛋白质是抗原性表位。在这项研究中，我们已经确定了沉淀7SK-RNA的自身抗体的真正对应物抗原。因此，我们发现他/她源自HeLa细胞mRNA和GTLL。使用cDNA文库，我们尝试使用7SK-RNA定位的患者血清作为探针来克隆自身抗体识别的蛋白质成分。选择了几种候选cDNA，并证实患者血清IgG是从大肠杆菌中从cDNA中表达的融合蛋白纯化的，从cDNA中表达的，从HELA细胞提取物中免疫沉淀的7SK-RNA。 2。检查抗7SK-RNP抗体的临床意义：使用大约500种新的胶原蛋白疾病的血清和可疑的患者在财政年度内访问医院的患者，使用RNA免疫沉淀和RT-PCR证实了五例患者血清免疫沉淀7SK-RNA的新病例。这些患者是类风湿关节炎和Sjogren综合征的患者。该抗体与前10名阳性患者汇总在一起，被认为是类风湿关节炎和Sjogren综合征中发现的自身抗体。