自己免疫疾患患者の自己抗体が認識する新規tRNA結合蛋白の解析に関する研究

自身免疫性疾病患者自身抗体识别的新型 tRNA 结合蛋白的分析研究

• 批准号: 14035227
• 负责人: 三森 経世
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14035227/
• 关键词: Wa抗原; NEFA; Nucleobindin-2; トランスファーRNA; 自己抗体; 自己免疫疾患; 強皮症

抗Wa抗体は強皮症に特異的に検出されるまれな自己抗体として報告し,その対応抗原は3-4種類のtRNAと結合する48kDaの蛋白であることを明らかにしていた.Wa抗原の実体は長く不明であったが,Wa抗原の遺伝子をクローニングしたところ,NEFAまたはNucleobindin-2(Nucb-2)として報告された分子と一致することが判明した.NEFA/Nucb-2はLeucine Zipper構造を有することからDNA結合蛋白と考えられるが,これまでのところDNAあるいはtRNAを結合したという報告はない.しかし,Wa抗原が一定の種類のtRNAと関連しNEFA/Nucb-2として同定されたことは,同分子が新たなtRNA結合蛋白であり,tRNAが関与する蛋白翻訳系あるいはtRNAの代謝などで未知の機能を持つRNPマシーンである可能性が高い.本研究では我々が見出した抗Wa抗体の対応抗原(Wa抗原,NEFA/Nucb-2)の機能を追求し,抗Wa抗体の自己免疫疾患における意義を検討した.1.Wa抗原に結合するtRNAの同定:患者Wa血清(抗Wa抗体のプロトタイプ血清)が免疫沈降したtRNAを抽出し,これを鋳型として既知のヒトtRNA配列から作成したプライマーを用いてRT-PCRを行ったところ,グルタミン酸,ヒスチジン,リジン,バリンの4種類のアミノ酸に対応するtRNAが同定された.2.Wa抗原の細胞内局在と細胞周期との関連:抗Wa抗体陽性血清を用いた間接蛍光抗体法で,Wa抗原は細胞周期とは無関係に核および細胞質の両方に分布することを確認し,DNAおよびtRNAの両方と結合するという当初の予想を裏付けた.3.自己免疫疾患における抗Wa抗体の陽性率:リコンビナントWa抗原を用いた免疫ブロット法により,抗Wa抗体が強皮症の33%と従来の報告(3.1%)より高頻度に検出されることを確認した.

Anti-Wa antibodies are specific for scleroderma and bind to a protein of 48 kDa that binds to 3 - 4 types of tRNA. Wa antigen is unknown in length. NEFA/Nucb-2 has a Leucine Zipper structure. The possibility that Wa antigen is associated with a certain tRNA species is high, and that the same molecule is associated with a new tRNA binding protein. This study found that anti-Wa antibodies and anti-Wa antigens (Wa antigen, NEFA/Nucb-2) function, anti-Wa antibody in immune disease significance to discuss. 1. Wa antigen binding tRNA identity: Patient Wa serum (Anti-Wa antibody anti-tRNA serum) immune sedimentation, tRNA extraction, DNA typing, known tRNA alignment, RT-PCR, 2. Relationship between the intracellular regulation and cell cycle of Wa antigen: Anti-Wa antibody positive serum using indirect fluorescent antibody method, Wa antigen cell cycle and no relationship between nuclear and cytoplasmic distribution, confirmation, DNA and tRNA binding, initial thinking, pay attention to the positive rate of anti-Wa antibody. Anti-Wa antibodies were detected in 33% of scleroderma cases and 3.1% of scleroderma cases.

项目成果

三森経世: "膠原病における自己抗体の多様性"総合臨床. 51(7). 2092-2097 (2002)

Tsuneyo Mimori：“胶原病中自身抗体的多样性”《一般临床实践》2092-2097（2002）。

Mimori T: "Clinical significance of anti-Ku autoantibodies : A serologic marker of overlap syndrome?"Intern Med. 41(12). 1096-1098 (2002)

Mimori T：“抗 Ku 自身抗体的临床意义：重叠综合征的血清学标志物？”Intern Med。

Fujii T, Okada M, Mimori T, Craft J: "The transmembrane form of TNFa drives auoantibody production in the absence of CD154 : Studies using MRL/Mp-Faslpr mice"Clin Exp Immunol. 130. 224-232 (2002)

Fujii T、Okada M、Mimori T、Craft J：“TNFa 的跨膜形式在没有 CD154 的情况下驱动抗体产生：使用 MRL/Mp-Faslpr 小鼠的研究”Clin Exp Immunol。

Kobayashi H, Hosono O, Mimori T, Kawasaki H, Dang N.H., Tanada H, Morimoto C: "Reduction of serum soluble CD26/dipeptidyl peptidase IV enzyme activity and its correlation with disease activity in systemic lupus erythematosus"J Rheumatol. 29(9). 1858-1866

Kobayashi H、Hosono O、Mimori T、Kawasaki H、Dang N.H.、Tanada H、Morimoto C：“系统性红斑狼疮血清可溶性 CD26/二肽基肽酶 IV 酶活性的降低及其与疾病活动的相关性”J Rheumatol。

Tanaka M, Ozaki S, Kawabata D, Kishimura M, Osakada F, Okubo M, Murakami M, Nakao K, Mimori T: "Potential preventive effects of follistatin-related protein/TSC-36 on joint destruction and antagonistic modulation of its autoantibodies in rheumatoid arthrit

Tanaka M、Ozaki S、Kawabata D、Kishimura M、Osakada F、Okubo M、Murakami M、Nakao K、Mimori T：“卵泡抑素相关蛋白/TSC-36对其自身抗体的关节破坏和拮抗调节的潜在预防作用