老化抑制遺伝子Klothoの発現調節に関する萌芽的研究

衰老抑制基因Klotho表达调控的探索性研究

• 批准号: 18659436
• 负责人: 川口 浩
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659436/
• 关键词: 老化; klotho; 転写制御; プロモータ

1)発現クロー二ング、サウズウエスタンスクリーニングによるklotho上流分子の探索 昨年までのルシフェラーゼアッセイを用いた検討で、klotho遺伝子プロモーター応答領域は転写開始点から-98bp〜-68bpおよび-53bpから〜15bpに存在することを突き止めた。本年度は、培養液中の血清に有無によって両シスエレメントに結合する分子め存在をgel-shift assayで確認した。その結果、-98bp〜-68bpへの特異的な結合がprobe mutagenesis、非標識probeによる競合阻害によって証明された。一方、-53bpから〜15bpの領域は発現のベースラインの維持に必要と推測された。更にinvivoでの結合もクロマチン免疫沈降法(ChlP)で確認された。しかしながら、両領域には既知の転写因子結合モチーフは存在せず、転写因子の特定に至ることは出来なかった。2)リン、Vit.Dによるklotho転写制御の検討 リンおよびVit.Dの投与によってklotho mRNA量が増加することをreal-time PCRで確認した。上記で同定したklothoプロモータコンストラクトを用いて、リン、Vit.Dの応答エレメントの同定を試みたが、結合部位および下流分子の同定にはいたらなかった。また、gel-shift assayおよびChlPによっても、リン、Vit.Dによって結合の増加する分子を特定することは出来なかった。

1) The exploration of the upper class of klotho ロ ロ, サウズウエスタ グ ス リ ニ ニ グによる グによる Yesterday in ま で の ル シ フ ェ ラ ー ゼ ア ッ セ イ を with い た beg で 検, traces of klotho 伝 son プ ロ モ ー タ ー 応 answer field は planning write starting point か ら - 98 bp to 68 bp お よ び - 53 bp か ら ~ 15 bp に exist す る こ と を tu き check め た. は this year, medium, の serum に presence of に よ っ て struck シ ス エ レ メ ン ト に combining す め る molecules exist を gel - shift assay で confirm し た. Youdaoplaceholder0 <s:1> results, -98bp to -68bpへ <s:1> specific な binding がprobe mutagenesis, and non-identified probeによる coexisting resistance によって proof された. On one side, the -53bp ら to 15bp <s:1> field has the occurrence of <s:1> ベ スラ スラ スラ <s:1> <s:1> maintain に necessary と speculation された. Further にinvivoで <s:1> in combination with チ ロ ロ チ された immunoprecipitation method (ChlP)で to confirm された. し か し な が ら, struck areas に は already know の planning write factor binding モ チ ー フ は exist せ ず, planning to write factor の に to specific る こ と は out な か っ た. . 2) リ ン, Vit D に よ る klotho planning write suppression の beg リ 検 ン お よ び. Vit D の cast with に よ っ て klotho mRNA in が raised add す る こ と を real - time PCR で confirm し た. Written で with fixed し た klotho プ ロ モ ー タ コ ン ス ト ラ ク ト を with い て, リ ン, Vit. D の 応 answer エ レ メ ン ト の with fixed を try み た が, combining site お よ び low molecular の be に は い た ら な か っ た. ま た, gel - shift assay お よ び ChlP に よ っ て も, リ ン, Vit D に よ っ て combining の raised plus す る molecular を specific す る こ と は out な か っ た.

项目成果

Cartilage tissue engineering using human auricular chondrocytes embedded in different hydrogel materials.

使用嵌入不同水凝胶材料中的人耳软骨细胞的软骨组织工程。

• 发表时间: 2006
• 期刊: J Biomed Mater Res A 78
• 作者: Hisayo Yamaoka;et al.
• 通讯作者: et al.

Decreased activities of daily living and associations with bone loss among aged residents in a rural Japanese community : the Miyama Study.

日本农村社区老年居民日常生活活动减少与骨质流失的关系：Miyama 研究。

• 发表时间: 2006
• 期刊: J Bone Miner Metab 24
• 作者: Hiroyuki Oka;et al.
• 通讯作者: et al.

Suppression of adjuvant-induced arthritic bone destruction by cyclooxygenase-2 selective agents with and without inhibitory potency against carbonic anhydrase II

• DOI: 10.1359/jbmr.051025
• 发表时间: 2006-02-01
• 期刊: JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH
• 影响因子: 6.2
• 作者: Katagiri, M;Ogasawara, T;Kawaguchi, H
• 通讯作者: Kawaguchi, H

Distinct association of gene polymorphisms of estrogen receptor and vitamin D receptor with lumbar spondylosis in post-menopausal women

• DOI: 10.1007/s00586-005-0005-8
• 发表时间: 2006-10
• 期刊: European Spine Journal
• 影响因子: 2.8
• 作者: Y. Koshizuka;N. Ogata;M. Shiraki;T. Hosoi;A. Seichi;K. Takeshita;Kozo Nakamura;H. Kawaguchi

Kruppel-like factor 5 causes cartilage degradation through transactivation of matrix metalloproteinase 9

• DOI: 10.1074/jbc.m709857200
• 发表时间: 2008-09-05
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Shinoda, Yusuke;Ogata, Naoshi;Kawaguchi, Hiroshi
• 通讯作者: Kawaguchi, Hiroshi