权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

分泌蛋白プロファイリング(secretome)によるマウス初期胚の機能評価

通过分泌蛋白分析（分泌组）对早期小鼠胚胎进行功能评估

基本信息

批准号：
19659426
负责人：
丸山哲夫
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659426/
关键词：
マウス胚プロテオミクス体外受精セクレトーム

项目摘要

昨年度に引き続き本年度は、哺乳類胚発生のメカニズムならびに胚の個体発生能を含めた質的ポテンシャルを、非侵襲的に解明し評価することを目的とした。そのために、マウス胚発生過程において培養液中に分泌されるタンパク質のプロファイル(secretome)を明らかにし、そのデータベース構築を目指すとともに、agingや機械的受精操作などがsecretomeにどのような影響を及ぼすかについて検討するための実験システムの整備を行った。まず、secretomeと胚発生・発育の関連を検討する際に、十分な胚盤胞到達率が得られなければならない。一方、プロテインチップ解析に供するためには、出来るだけ少量の培養液で行う必要があり、これは胚発生・発育にとって厳しい環境となる。このように、両者は相反するため、至適条件の確立が極めて重要である。そこで、培養液の変更など種々の検討を行った結果、60μ1の培養液量で約90%の胚盤胞到達率を再現性良く得られる培養システムを確立し、引き続いてその実験システムにより得られた各時期の培養液をプロテインチップ解析に供した。その結果、コントロール培養液に比較して、胚存在下の培養液では、複数の特異的蛋白ピークが検出され、また時期に応じてそのプロファイルは変化した。これらの一連のsecretomeのプロファイリングと胚盤胞到達率との関連を検討するとともに、今回検出された複数の特異的蛋白の同定を目指し、MALDI/TOF-MS質量分析計への解析に供するに必要な実験システムの更なる構築を行った。昨年度より引き続いて本年度得られた上記の成果は、マウスのみならずヒト胚のqualityの非侵襲的評価システムを確立するうえで、重要な基盤データになると考えられる。

Yesterday's year's results, this year's results, mammal embryos' individual results It can be used for the ポテンシャルを that contains めた, and the non-invasive に解明しreview価することをpurpose とした. In the process of embryonic development of そのために and マウス embryos, において secretes されるタンパク性のプロファイル(secretome)を明らかにし、そのデータベースconstructed item Refers to the mechanical fertilization operation of aging and aging.ような Impact を and ぼすかについて検恙るための実験システムの综合を行った.まず、SecretomeとEmbryonic 発生・発発のassociated を検question するinteriorに、十なblastoderm cell arrival rate が得られなければならない. One side, プロテインチップanalyze the supply するためには, come out the るだけsmall amount of cultivation The liquid is necessary and the environment is the same as the environment.このように、両人は opposite するため、It is extremely important to establish the optimum conditions.そこで, the culture medium was changed and the results were good, the blastoderm cell arrival rate was about 90% with the culture medium volume of 60μ1, and the reproducibility was good.るcultivation システムをestablishedし、inducedき続いてその実験システムによThe analysis of the culture medium of various periods in the company is provided.そのRESULTS, コントロール medium に comparison して, culture medium in the presence of embryos では, plural の特The different proteins are different from each other, and they are different from each other.これらの一连のsecretomeのプロファイリングと blastoderm cell arrival rate とのrelated を検褜するとともに、this time 検出されたpluralの特The identification and analysis of different proteins by MALDI/TOF-MS mass spectrometers are necessary and the construction and operation of the proteins are necessary. Last year's results were recorded this year, and this year's achievements were recorded. ity's non-intrusive evaluation is established and important.