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RNA結合タンパクの局在と口腔がんの悪性度

RNA结合蛋白的定位与口腔癌的恶性肿瘤

基本信息

批准号：
19659517
负责人：
東野史裕
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659517/
关键词：
HuR 悪性度 E4orf6 c-fos c-myc 核外輸送安定化 ARE-mRNA アデノウイルス

项目摘要

AU(アデニン-ウラシル)-rich element (ARE)はc-fos、 c-myc、 COX-2などの細胞の増殖に関わる遺伝子のmRNAに存在し、AUUUAをコアとする繰り返し配列から成る領域である。我々はアデノウイルスのがん遺伝子産物E4orf6がARE-mRNAを核外輸送・安定化することにより細胞をがん化することをこれまでに見出している。E4orf6は発がんのみならず、がん細胞の悪性化に関わるタンパクでもありE4orf6によるARE-1nRNAや同時に輸送されるHuRの輸送は、細胞のがん化やがんの悪性化の指標となりうる。本研究の目的は口腔がん細胞でHuRタンパクの細胞質への局在と、そのがん細胞の悪性度との関連を調べ、HuRの局在が口腔がん細胞の悪性度の指標になるか検討することである。口腔がん組織を用いて、HuRタンパクの局在を検討した。まず、HSC-3やCa9.22などの口腔がん培養細胞を用いてセルブロックを作成し、免疫染色の条件検討を行つた。次に、この染色条件で、手術材料から得られた切片を用いてHuRの免疫染色を行うによりHuRの局在を検討した。その結果、がん組織の細胞では細胞質側にもHuRタンパクが存在することがわかり、これに対して正常組織の細胞では主に核のみにHuRが局在していることが判明した。また、白板症の患者から得られたサンプルを用いて同様の検討を行つたところ、まだサンプル数は不十分であるが、予後不良のサンプルについてはHuRが核外輸送されていることも確認された。さらに、培養細胞を用いて、c-fos、 c-myc、 COX2などのARE-mRNAの局在をin situ hybridization法で検討しところ、がん細胞ではこれらのmRNAが核外輸送されていることも明らかになった。以上の結果より、口腔がんでは、HuRやARE-mRNAが核外輸送されていることが明らかになり、HuRの局在が口腔がん細胞の悪性度の指標となりうることがわかった.

AU(アデニン-ウラシル)-rich element (ARE)はc-fos、c-myc、 COX-2's proliferation of cells and the presence of mRNA in AUUUA's cells are the same as the field of expression. Our original product E4orf6 ARE-mRNA is outside the nucleus Transport and stabilize the cells. A RE-1nRNA can be used to transport HuR at the same time, and can be used as an indicator of cell transformation. The purpose of this study is to measure the properties of oral cavity cells and the cytoplasmic localization of oral cavity cells. The relationship between human and HuR is related to the degree of sex of oral cavity cells. Oral tissue を use いて, HuR タンパクのbureau in を検した.まず, HSC-3 and Ca9.22 などの口がん cultured cells were made with いてセルブロックを, and the conditions for immunostaining were determined. The staining conditions of the times and the surgical materials were obtained and the sections were sliced and immunostained with the HuR and the HuR was stained in the bureau.その results, がん tissue cells では cytoplasmic side にもHuR タンパクが existence することがわかり, It is clear that the main nucleus of the cells of the normal tissue is the HuR.また、Patients with white plate syndrome から got られたサンプルを用いて同様の検検行つたところ、まだサンプル数はIt's not very good, and it's a good thing after the bad treatment. In situ The hybridization method is used to carry out extranuclear transport of mRNA in cells and to carry out extracellular transport. The results of the above are the same as the oral cavity and the extranuclear transport of HuR ARE-mRNA.明らかになり、HuRの区 in the oral cavity がん cell の悪性のINDICATOR となりうることがわかった.