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筋形成過程における収縮性蛋白質の集合制御の分子機構

肌生成过程中收缩蛋白组装控制的分子机制

基本信息

批准号：
01480024
负责人：
大日方昂
金额：
$ 2.94万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01480024/
关键词：
筋原繊維形成骨格筋アクチン cDNA アクチン調節蛋白質筋発生

项目摘要

1.幼若筋のアクチン調節蛋白質(ADFとコフィリン)の構造決定:コフィリンはpH依存的なアクチン集合制御因子、ADFはpH非依存的なアクチン脱重合因子で、ともに幼若筋で働く。これらの構造と役割をさらに理解するために、鶏胚骨格筋から得たmRNAに対するλgtllcDNAライブラリ-より各蛋白質の全アミノ酸配列に相当するcDNAを、それぞれに対する特異抗体を用いてクロ-ニング、その全塩基配列を決定した。塩基配列から知られる蛋白質の一次構造はコフィリンでは166アミノ酸残基、ADFでは165残基である。今回決定されたニワトリ骨格筋コフィリンのアミノ酸配列は、既に決定されたブタ脳のコフィリンの場合と80%のホモロジ-を示した。また両蛋白質のアクチン重合への効果には顕著な差があるにも拘らず、両者のアミノ酸配列には高い(約70%)のホモロジ-が認められた。また、両蛋白質の一次構造にはSV40T抗原でしられている核移行シグナル、トロポミオシンとの共通配列、他のアクチン結合蛋白質(ゲルゾリン、プロフィリン、フラグミン)と相同な配列が存在した。両蛋白質の機能的な違いが一次構造上のどの部位に規定されるか更に検討中である。2.筋発生過程での発現変化:ADFは筋の成熟につれその発現は低下するが、コフィリンは成熟筋でも発現は持続することがわかった。3.細胞内での蛋白質の存在パタ-ン: 蛍光抗体法により検討した。コフィリン、ADFとも通常の培養筋細胞では主に細胞質に拡散している。筋管細胞をDMSO処理すると、筋細胞質に存在したコフィリンは核内に移行しアクチンとともに顕著なロッド状構造を形成するのが認められた。さらに、コフィリンは伸長期の筋細胞の末端に集合、また熱ショックを受けた筋細胞でアクチンとともに顆粒状構造に集合など多彩な振舞をするのに対し、ADFは常に細胞質に拡散して存在した。

1. The structure of ADF とコフィリン is determined by: コフィリンは pH-dependent Naikan aggregation control factor, ADF, pH-independent nakara decoupling factor, and Yorukansuji.これらのstructural and operative cutting をさらにUnderstanding するために、鶏Embryonic bone grid からgetたmRNAに対するλgtllcDNAライブラリ-よりeach egg The white matter all-amino acid sequence is equivalent to cDNA, and the specific antibody is determined by all-containing antibodies. The primary structure of the protein is composed of 166 amino acid residues and 165 residues of ADF. This time, we have decided on the acid combination of されたニワトリbone lattice and コフィリンのアミノThe setting is 80% of the time when the product is set.また両protein のアクチン coincident effect へのeffect には顕出な difference があるにも氉ず, The のアミノ acid formula is high (approximately 70%) of the same acid.また、両protein primary structureにはSV40T antigen でしられているnuclear migration シグナル、トロポミオシンとの合Wild arrays, other binding proteins (ゲルゾリン, プロフィリン, フラグミン) and other identical analytes exist.両The function of the protein is violated and the parts of the structure are stipulated in the original structure. 2. The process of tendon growth and development: ADF, the maturity of tendons, and the low development of tendons.下するが、コフィリンは mature tendons でも発 appear はhold続続することがわかった. 3. Inspection of the existence of intracellular proteins: The method of using light antibody method is used.コフィリン, ADF and ともNormally cultured muscle cells are mainly used to sterilize the cytoplasm. Muscle cells were treated with DMSO, and muscle cytoplasm was present and intranuclear was detected. The migration of the しアクチンとともに顕 with the なロッド-like structure をforms the するのが见められた.さらに、コフィリンは During the elongation period, the end of tendon cells gathers, and また热ショックをReceives the tendon cells and でアクチンとThe granular structure of ともに is a collection of colorful な vibration dance をするのに対し, and the ADF is often にcytoplasmic and scattered して exists した.