コフィリン遺伝子変異による筋機能の変異-新しいタイプの筋疾患の探索-

cofilin基因突变引起的肌肉功能突变 - 寻找新型肌肉疾病 -

• 批准号: 11878136
• 负责人: 大日方 昂
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11878136/
• 关键词: 筋原線維; コフィリン; アクチン結合蛋白質; アクチン; アクチン線維; 筋原線維形成; 横紋筋; 骨格筋

細胞内でのアクチン集合は種々のアクチン結合蛋白質により制御されるが、それらの内でコフィリンは細胞内で活性制御を受けて、アクチン繊維の動的な再編成をを担う最も重要なアクチン結合蛋白質の1つである。筋で顕著に発現する筋型コフィリンの変異に起因する筋疾患の可能性を想定し、マウスで実験的に検討した。即ち、筋型コフィリン遺伝子のコード域を相同組み替え法によりLacZとneoRで置き換えて筋型コフィリン欠損ES細胞(MCF-/-細胞)を作成し、このES細胞をもつキメラマウスを作成した。MCF-/-細胞に由来する骨格筋をX-gal染色により顕在化し、その部位を組織学的に解析した。コフィリン欠損細胞を多くもつ部位(X-gal染色が強い部位)では、筋繊維の顕著な大小不同、単核細胞の集中がみられるなど、筋ジストロフィー筋に類似した筋組織の壊死・再生を示す所見が得られた。心筋では、MCF-/-細胞が集中した領域でも顕著な異常は見られなかった。独立した2系統のMCF-/-ES細胞を用いたキメラで同様な症状が観察された。MCF+/-ES細胞由来の部位ではこの様な症状は観察されない。新生児では、かなりキメラ率が高い筋でも異常な形態が見られていない。以上の結果は、コフィリンは筋の形成と維持に重要であり、その欠損は筋疾患を招くことを示唆している。

Intracellular で の ア ク チ ン collection は kind 々 の ア ク チ ン binding protein に よ り suppression さ れ る が, そ れ ら の within で コ フ ィ リ ン で は cell active suppression を by け て, ア ク チ ン 繊 d の move な again plait を を bear う も most important な ア ク チ ン binding protein 1 つ の で あ る. Jin で 顕 the に 発 now す る reinforcement type コ フ ィ リ ン の - cause different に す る muscle disorders の possibility を し scenarios, マ ウ ス で be 験 of に beg し 検 た. Namely ち, reinforcement type コ フ ィ リ ン heritage 伝 son の コ ー ド domain を み same group for え method に よ り LacZ と neoR で buy き in え て reinforcement type コ フ ィ リ ン owe loss ES cells (MCF - / - cells) を し, consummate こ の ES cells を も つ キ メ ラ マ ウ ス を made し た. MCF - / - cells に origin す る skeletal muscle を X-ray gal dyeing に よ り 顕 in し, そ の parts を histological に parsing し た. コ フ ィ リ ン owe damaged cells more than を く も つ parts (X - gal dyeing が い parts) で は, jin 繊 d の 顕 な size to differ, 単 nuclear cells の concentrated が み ら れ る な ど, jin ジ ス ト ロ フ ィ ー reinforcement に similar し た muscle tissue の 壊 death, renewable を が have shown す see ら れ た. In the field of <s:1> た of cardiac muscle で で and MCF-/- cell が concentration で 顕 顕 な anomalies な can be found in られな な った った. Independent <s:1> た2 system <s:1> MCF-/ -es cells を are examined for された using the same な symptom が観 as たキメラで たキメラで. The MCF+/-ES cells originate from the site of the lesion で で されな <e:1>, な patterns, な symptoms, <e:1> 観, and されな されな. New where で は, か な り キ メ ラ rate high が い reinforcement で も abnormal な form が see ら れ て い な い. の above results は, コ フ ィ リ ン は と form tendons の に important で あ り, そ の owe loss は muscle disorders を recruit く こ と を in stopping し て い る.

项目成果

Mohri,Kurato: "Expression of cofilin isoforms during development of mouse striated muscles."J.Muscle Res.Cell Motil.. 21. 49-57 (2000)

Mohri,Kurato：“小鼠横纹肌发育过程中丝切蛋白亚型的表达。”J.Muscle Res.Cell Motil.. 21. 49-57 (2000)

Soeno, Yoshinori: "BDM(2,3-Butanedione monoxime), an inhibitor for myosin-actin interaction, suppresses myofibrillogenesis in skeletal muscle cells in culture"Cell Tiss. Ress.. 295. 307-316 (1999)

Soeno，Yoshinori：“BDM（2,3-丁二酮单肟）是肌球蛋白-肌动蛋白相互作用的抑制剂，可抑制培养的骨骼肌细胞中的肌原纤维形成”Cell Tiss。

Okada, Kyoko: "XAIP1 : a Zenopus homologue of yeast actin interacting protein 1(AIP1) which accerates disassembly of actin filaments cooperatively with ADF/cifilin family proteins"J. Cell Biol.. 112. 1553-1565 (1999)

Okada, Kyoko：“XAIP1：酵母肌动蛋白相互作用蛋白 1 (AIP1) 的 Zenopus 同源物，可与 ADF/cifilin 家族蛋白协同加速肌动蛋白丝的分解”J.

Maekawa, Midori: "Activation of LIM-kinase for cofilin phosphorylation by Rho-associated kinase in Rho-mediated actin reorganization"Science. 285. 895-898 (1999)

Maekawa, Midori：“在 Rho 介导的肌动蛋白重组中，通过 Rho 相关激酶激活 LIM 激酶以进行丝切蛋白磷酸化”《科学》。

Hayakawa,Kimihide: "Orientation of smooth muscle-derived A10 cells in culture by cyclic isoforms during development of mouse striated muscles."Zool.Sci.. 17. 617-624 (2000)

Hayakawa, Kimihide：“小鼠横纹肌发育过程中循环亚型对培养中平滑肌来源的 A10 细胞的定向。”Zool.Sci.. 17. 617-624 (2000)