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周産期ウイルス感染のDNA診断

围产期病毒感染的DNA诊断

基本信息

批准号：
02454376
负责人：
川名尚
金额：
$ 4.29万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至 1992
项目状态：
已结题

项目摘要

1.単純ヘルペスウイルス(HSV)のPCR法による検出昨年度に確立したPCR法を用いて臨床検体からのHSVゲノムの検出を試みた。臨床検体は、女性性器より採取した。外陰や子宮頸部から綿棒にて擦過して得たものを、培養液にてすすぎ検体とした。これらを遠心後、上清を培養R-66細胞に接種してウイルスの分離を行った。沈澱よりDNAを抽出し、PCR法にてHSVゲノムの検出を行った。分離されたウイルスは、螢光標識マウスモノクローナル抗体を用いて固定と型の決定を行った。臨床検体の検討に先き立ち、新鮮分離株 HSV-1 50株、HSV-2 34株の計84株についてPCR法を用いて検討した結果、全例に陽性所見を得た。また、型分けについても100%一致した。以上より、このPCRの系は、本部で分離されるHSVの株は、1型、2型共にほとんど検出できることが判明した。臨床検体は、妊婦、性器ヘルペスなどから得られた94例について検討した。1型分離陽性が5例、2型分離陽性が13例であった。これらについて、PCR法を行った所、1型につては5例全例、2型については、9例(69%)に陽性所見が得られた。一方、分離陰性の76例中8例(11%)に陽性所見が得られた。分離陽性でPCR法陰性になった例は、ウイルスDNAが十分とれてなかった可能性が考えられる。一方、分離が陰性でもPCR法が陽性であることからPCR法の方が感度がより良い可能性が示された。2.ヒトパピローマウイルス(HPV)のPCR法による検出昨年度確立したコンセンサスプライマーを用いる性器に感染するHPVの検出法を外陰部や子宮頸部の病孝に応用し、本法の高い感度と特異性が証明された。

1. PCR method of pure HSV (HSV) The PCR method that was established last year was used in clinical trials of HSV HSV. Clinical examination of body and female genitals. The vulva and the cervix of the uterus are wiped with a cotton stick, and the culture fluid is applied to the body. After centrifugation, the supernatant was cultured and R-66 cells were inoculated and separated and separated. The precipitated DNA is extracted, and the PCR method is used for HSV extraction. Separation of されたウイルスは, fluorescently labeled マウスモノクローナルantibodies are determined by いてfixation and type determination. The results of the clinical examination using the PCR method, including 50 freshly isolated HSV-1 strains and 84 HSV-2 34 strains, were obtained using the PCR method, and all cases were positive.また, type points けについても100% consistent した. The above-mentioned PCR strains, strains of HSV isolated from the headquarters, type 1, and type 2 are all found together. Clinical examination of the body, pregnant women, and sexual organs was carried out in 94 cases. There were 5 cases of type 1 isolates positive and 13 cases of type 2 isolates positive. There are 5 cases of type 1 につては, 9 cases (69%) of type 2 については, and 9 cases (69%) were positive. On one side, 8 out of 76 cases (11%) with negative isolation results were found to be positive. Isolation of positive and negative cases by PCR and DNA testing is very possible and possible. On the one hand, the sensitivity of the PCR method and the sensitivity of the PCR method and the possibility of isolation of the negative and positive are all shown. 2. PCR method of HPV (HPV) Yesterday, it was established that the HPV infection was caused by genital infection. This method can be used to treat diseases of the vulva and cervix of the uterus. This method has high sensitivity and specificity and has been proven to be effective.