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高度好熱性細菌Thermus thermophilusの遺伝学的研究とその応用

高度嗜热菌嗜热栖热菌遗传研究及其应用

基本信息

批准号：
03454066
负责人：
星野貴行
金额：
$ 2.69万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至 1993
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、高度好熱性細菌Thermus thermophilusの耐熱性生体機能の様々な分野への応用を目指して、T.thermophilusの遺伝学的解析・育種法の確立を目的として行なわれたものである。本研究では、まず、Thermus thermophilus HB27株の染色体の制限酵素切断地図の作製に成功した。その結果、本菌株のゲノムサイズが約2Mbであることが明らかとなった。また、HB27株が、主染色体以外に、約250kbの巨大プラスミドpTT27を保有していることも併せて明らかにした。次に、本菌が有している性質のひとつであり、遺伝学的解析・育種法として有用と考えられる形質転換機構について、そのメカニズムを解析した。また、形質転換を用いて近接した遺伝子のマッピングが可能であることを具体的に明らかにした。さらに、プラスミドの形質転換効率の改善法についても検討を加え、その効率を30倍増大させることにも成功した。本菌の遺伝学的確立の基礎となる各種変異株の分離と解析も精力的に行なった。特に、本菌の特長のひとつであるカロテノイド生産能に関しては、カロテノイド低生産変異株、過剰生産変異株を多数分離し、それらの性質について遺伝学的および生化学的検討を加えた。各種遺伝子のクローニングを行い、カロテノイド生合成系の律速酵素の一つと考えられるフィトエン合成酵素の遺伝子(crtB gene)、プロリン生合成系の遺伝子(proC gene)については、全塩基配列も決定した。さらに、これら遺伝子を含む種々の遺伝子の染色体制限酵素地図上の存在部位を決定し、Thermus thermophilus HB27株染色体の遺伝子地図のプロトタイプを完成した。

This study aimed to identify the biological functions of thermophilic bacteria Thermus thermophilus, analyze the genetic characteristics of T.thermophilus and establish breeding methods. In this study, we succeeded in the control of chromosome restriction enzyme of Thermus thermophilus HB27 strain. The results of this strain are about 2Mb. The HB27 strain contains a 250kb large chromosome outside the main chromosome. In addition, the nature of this strain has been analyzed, and the genetic analysis and breeding method have been analyzed. This is the first time I've ever seen a person who's been in a relationship with someone else. In addition, the improvement method of the physical transformation efficiency of the first step is to increase the efficiency of the first step by 30 times. The establishment of the genetic basis of this strain and the isolation and analysis of all kinds of heterotrophic strains In particular, the characteristics of this strain are related to the production ability, low production and high production of mutants. Most of them are isolated and their properties are discussed in genetic and biochemical methods. A study on the gene of crtB gene, proC gene, pro In this paper, we determine the position of chromosome restriction enzyme on the chromosome of Thermus thermophilus HB27 strain.