マラリア原虫表面抗原B細胞及びT細胞エピトープの分子マッピングと多型性の解析

疟原虫表面抗原B细胞和T细胞表位的分子图谱和多态性分析

• 批准号: 04454193
• 负责人: 田辺 和裄
• 金额: $ 4.29万
• 依托单位: Osaka Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 1994
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04454193/
• 关键词: マラリア; plasmodium; 表面抗原; エピトープ; 多型性; 遺伝子; 抗体; Plasmodium

1.熱帯熱マラリア原虫スポロゾイト表面タンパク質(CSP)遺伝子の多型:CSP遺伝子の多型をタイで分離した18株について調べた。CSPの主要T細胞エピトープであるTh2R,Th3R,CTL領域に変異が集中していたが、CS・T3では変異が認められなかった。主要B細胞エピトープであるテトラペプチド反復領域では、点突然変異、反復単位の欠出・挿入、遺伝子内組換え、という三つの機構が多型の形成機構であると示唆された。また、T細胞エピトープとテトラペプチド反復部位との間では変異の遺伝的連関性はなかった。2.熱帯熱マラリア原虫メロゾイト表面抗原(MSPI)遺伝子の多型:タイ分離株についてMSP1遺伝子の多型をブロック1-4、ブロック13-17領域で検討した。3′末端側ではMSP1の代表対立遺伝子であるMAD型とK1型の遺伝子内組換えは認められなかった。変異塩基数は5′側の保存領域と比べて約1/2と少なく、18個あった変異はすべてdimorphicで、非同義語置換になっていた。C末端側の19kDポリペプチド部分に存在する12個のシステイン残基は完全に保存されていた。一方、19kD切断部位のオリゴペプチドに反応するモノクローナル抗体を作成し、そのエピトープを分子マッピングして同定した。また、MSP1の分子疫学的解析を行うために、血液塗抹標本から原虫DNAを分離するという技術を開発した。3.MSP1T細胞エピトープ部位の決定:MSP1特異的なT細胞のクローンを3人の日本人から確立した。MSP1のブロック1-6のうち、CD4^+・8^-クローンが反応したのは変異領域であるM6ブロックのポリペプチドのみであった。13-16残基の合成オリゴペプチドを用いた抗原特異的増殖で見ると、それぞれのT細胞クローンは5種類以上の異なるペプチドを認識し、その反応性にはMHCの拘束性の存在が示唆された。

1. Polytype of CSP gene: Polytype of CSP gene was isolated from 18 strains. CSP's main T cells are concentrated in Th2R, Th3R,CTL domains, CS·T3, etc. The main B cells are divided into three types: repeated domain, point sudden change, repeated single position, short output, insertion, internal component change, middle component change, and multiple type formation mechanism. T cells have a strong correlation with the number of repeat sites. 2. Polytypes of MSP1 gene: isolates were detected in the domains of 1-4, 13-17. 3′-terminal MSP1 and MSP2-terminal MSP1-terminal The 5′-side preservation domain is about 1/2 smaller than the 5′-side preservation domain, and the 5 ′-side preservation domain is about 18 smaller than the 5 ′-side preservation domain. The 19kD residues on the C-terminal side were completely preserved. A side, 19kD cut off the site of the anti-virus antibody preparation, the anti-virus molecule The analysis of MSP1 molecular epidemiology, blood smear, protozoan DNA isolation and technology development 3. Determination of MSP1 T cell sites: MSP1 specific T cell sites were established in Japanese. MSP1 1-6 CD4^+·8^- 13-16 The synthesis of residues in the antigen-specific amplification of T cells is demonstrated by the recognition of more than 5 different types of T cells, and by the presence of MHC binding.

项目成果

S.Jongwutiwes.K.Tanabe,et al: "Molecular epidemiology of the circumsporozoite protein of Plasmodium falciparum" 寄生虫学雑誌. 42. 91 (1993)

S. Jongwutiwes. K. Tanabe 等人：“恶性疟原虫环子孢子蛋白的分子流行病学”，寄生虫学杂志 42. 91 (1993)。

S.Joungwutiwes.K.Tanabe and H.Kanbara: "Sequence conservation in the C-terminal part of the precursor to the major merozoite surface proteins (MSP1) of Plasmodium falciparum from field isolates" Molecular and Biochemical Parasitology. 59. 95-100 (1993)

S.Joungwutiwes.K.Tanabe 和 H.Kanbara：“来自现场分离株的恶性疟原虫主要裂殖子表面蛋白 (MSP1) 前体 C 端部分的序列保守性”《分子和生化寄生虫学》。

S.Jongwutiwes.K.Tanabe.M.K.Hughes.H.Kanbara. and A.L.Hughes: "Allelic variation in the circumsporozoite protein of Plasodium falciparum from Thai field isolates" American Journal of Tropical Medicine and Hygiene. 51. 659-668 (1994)

S.Jongwutiwes.K.Tanabe.M.K.Hughes.H.Kanbara。

田辺和裄.Somchai Jongwutiwes.神原廣二: "マラリア原虫の抗原多型性と抗原変異" 臨床と微生物. 19. 483-488 (1992)

Somchai Jongwutiwes、Koji Kambara：“疟疾寄生虫的抗原多态性和抗原变异”《临床和微生物学》19. 483-488 (1992)。

S.Jongwutiwes.神原廣二 田辺和裄: "マラリア原虫メロゾイト表面抗原MSP1の変異について" 原生動物学雑誌. 27. 48-49 (1993)

S. Jongwutiwes。Koji Kambara 和 Kazumi Tanabe：“疟原虫裂殖子表面抗原 MSP1 的突变”《原生动物学杂志》27. 48-49 (1993)。