脳内産生サイトカインの作用機序-アストロサイト細胞骨格間の相互作用と機能の変化を中心に

大脑中产生的细胞因子的作用机制 - 重点关注星形胶质细胞骨架和功能变化之间的相互作用

基本信息

批准号：
05454669
负责人：
田中亮
金额：
$ 3.14万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

脳内で産生されるグリア細胞成長因子(GMF)はアストロサイトに特異的に作用するサイトカインで、その増殖と分化を促進する。本研究でわれわれはGMFのアストロサイトに対する分化誘導作用の機構を解明することを目的に、GMFで刺激されたアストロサイトの細胞分化における細胞骨格、特に主要細胞骨格線維であるマイクロフィラメントとグリアフィラメントの特性を検討した。培養ラットアストロサイトの粗細胞骨格画分より特異的に脱重合抽出されたマイクロフィラメント(MF)とグリアフィラメント(GF)は、それぞれ100mM KClと10mM MgCl_2、150mM NaClと10mM MgCl_2により再構成された。再構成されたマイクロフィラメントはS1アフィニティーカラムで精製されたフィラメントにおいてさえアクチンの他にビメンチンやGFAPの中間径フィラメント成分など多数のマイナーなタンパク質の存在が認められた。この結果はマイクロフィラメントにおける多数の関連タンパク質の存在と中間径フィラメントとの相互作用を示唆するものであった。同様に再構成グリアフィラメントにおいてもビメンチンとGFAPの他にアクチンをはじめとして多数のマイナーなタンパク質の存在が認められた。マイクロフィラメントとグリアフィラメントとの相互作用を実証するするために、再構成系においてMFとGFの重合を共に抑制するalpha-シアロシルコレステロール(SC)存在下でMFのGF重合に対する作用を検討した。SC存在下でMFはGFの重合を著しく促進した。またウサギ骨格筋G-アクチンはSC存在下でウシレンズから精製されたビメンチンの重合を促進した。これらの知見よりMFはアクチンとビメンチンとの相互作用を介してGF重合を促進することが示唆された。

大脑中产生的神经胶质生长因子（GMF）是一种专门针对星形胶质细胞并促进其增殖和分化的细胞因子。在这项研究中，我们研究了细胞骨架的特性，尤其是主要的细胞骨架纤维，微丝和神经胶丝在GMF刺激的星形胶质细胞的细胞分化中。用100 mM KCl和10 mM MMGCL_2、150 mM NaCl和10 mm MMMGCL_2分别重构了从培养大鼠星形胶质细胞的粗细细胞骨架级分中特异性解聚并提取的微丝（MF）和神经胶丝（GF）。即使在S1亲和力柱上纯化的细丝中，也观察到许多次要蛋白质（包括肌动蛋白和中间丝成分）的存在。该结果表明，微丝中存在许多相关蛋白质以及与中间细丝的相互作用。同样，在重构的胶质膜中，除了波形蛋白和GFAP外，还观察到许多包括肌动蛋白在内的小蛋白质。为了证明微丝与胶质片之间的相互作用，研究了MF在存在α-硅烷基胆固醇（SC）的情况下MF对GF聚合的作用，该作用抑制了重建系统中MF和GF的聚合。 MF在SC存在下显着促进了GF的聚合。兔骨骼肌G-肌动蛋白还促进了在SCS存在下从牛透镜中纯化的波形蛋白的聚合。这些发现表明，MF通过肌动蛋白和波形蛋白之间的相互作用促进GF聚合。