遺伝子導入法を用いた疾患モデルマウスの作出しと疾患制御機構に関する研究

利用基因转移方法建立疾病模型小鼠并研究疾病控制机制

• 批准号: 05454686
• 负责人: 藤原 道夫
• 金额: $ 3.97万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 1994
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05454686/
• 关键词: トランスジェニックマウス; 疾患モデル動物; 自己免疫性肝疾患; 病態制御

アロIAトランスジェニックマウス(TgM)を作出し、肝に限局した自己免疫疾患様病態モデルをつくる試みを行った。まずアロIA(A^d_α A^d_β)cDNAを調製し、これを了じめクローニングしてある血清アミロイドPタンパク質遺伝子につなぎ、C57BL/6(B6)マウス(ハプロタイプH-2^1)受精卵に導入して、肝に限局してアロIa^d抗原を発現するTgMを作出した。遺伝子が導入されているかどうかは、TgMの尾の一部をとって、Southern blottingによって調べた。抗原の発現は免疫組織化学的染色法によって調べた。7系統のTgMが確立された。この中からIa^d抗原の発現が比較的強い3系統を選んで解析を進めた。これまでにわれわれはMHCの異なるF1マウスに移入細胞対宿主反応を起こし、自己免疫疾患様病態を誘発してその機序について検討を行ってきた。このときの実験条件に基づき、B6マウス脾よりT細胞を分離し、それら1〜2X10^7ヶを上記TgMに移入した。2週後に屠殺して肝の病理組織学的検索を行った。F1マウスでみられたような原発性胆汁性肝硬変様病変は認められなかった。TgMでは移入リンパ球が肝内に到達せず、アロIa抗原を識別して活性化する機序が仂いていない可能性が考えられる。この点を了じめ活性化したリンパ球を移して検討する必要があると考えられる。この研究を実施している間に、自己免疫性肝疾患様病変の解析をF1マウスを用いて進めCD4^+ CD8^+細胞の役割。細胞間接着分子の役割等について検討し、成果を挙げることができた。

The disease is caused by immune system diseases. TgM was developed to modulate the AROIA (A^d_α A^d_β)cDNA and introduce it into the C57BL/6(B6) Matus (Haproidap H-2^1) fertilized eggs to produce the AROIA ^d antigen in the liver. A part of TgM's tail is introduced into the soil, and the Southern blotting is carried out. Antigen expression was detected by immunohistochemical staining. 7. TgM of system is established. A comparative study of the expression of Ia^d antigen in the middle of the three systems was conducted. This is the first time that MHC has been used to induce immune disease. The conditions for the isolation of T cells are as follows: 1 ~ 2X10^7 After 2 weeks, the pathological findings of the liver were investigated. F1 TgM may be able to migrate to the liver and identify Ia antigens. The point is to activate the ball and move it to the next level. This study was carried out in the middle of the year, and the analysis of autoimmune liver diseases was carried out in the middle of the study. CD4^+ CD8^+ cells were used to analyze the disease. Cell to cell adhesion molecules, etc.

项目成果

K.Suzuki et al.: "Mechanism of auto immune disease by graft-versus-host reaction.Role of CD8^+ cells in the development of hepatic and ductallesions…" Lab.Invest.(in press). (1994)

K.Suzuki 等人：“移植物抗宿主反应导致的自身免疫疾病的机制。CD8^+ 细胞在肝脏和导管病变发展中的作用……”Lab.Invest.（出版中）。

T.Kimura et al.: "Induction of auto immune disease by graft-versus-host reaction across MHC class II difference…‥" Clin.Exp.Immunol.(in press). (1994)

T.Kimura 等人：“跨越 MHC II 类差异的移植物抗宿主反应诱导自身免疫疾病……”Clin.Exp.Immunol.（出版中）。

Y.Ikarashi,et al.: "Imminosuppressive activity of macnohages in micl undergoing graft-versus-host reaction due to MHC class I plus II difference." Immunology. 79. 95-102 (1993)

Y.Ikarashi 等人：“由于 MHC I 类和 II 类差异，在经历移植物抗宿主反应的小鼠中，巨噬细胞的免疫抑制活性。”

K.Suzuki et al.: "Exocrinopathy resembling Sjogren's syndrome induced by a munine retrovirus" Lab.Invest.69. 430-435 (1993)

K.Suzuki 等人：“由鼠逆转录病毒引起的类似于干燥综合征的外分泌病”Lab.Invest.69。

T.Kimura: "Induction of autoimmune disease by graft-versus-host reaction across MHC class II difference:modification of the dueace in IL-6 transgenic mice." Clin.Exp.Immunal.95. 525-529 (1994)

T.Kimura：“跨 MHC II 类差异的移植物抗宿主反应诱导自身免疫性疾病：IL-6 转基因小鼠中的 Dueace 修饰。”