モノクローナル抗体を用いたPQQ及びOPQの微量高感度定量法の確立

单克隆抗体高灵敏痕量定量测定PQQ和OPQ方法的建立

• 批准号: 05660149
• 负责人: 成田 宏史
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kyoto Women's Junior College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05660149/
• 关键词: PQQ; OPQ; モノクローナル抗体; 酵素抗体法

PQQ(ピロロキノリンキノン)は当初、酸化還元酵素の補酵素として発見されたが、現在ではPQQに肝臓障害や白内障の予防作用があること、PQQのグレシン付加体であるOPQ(オキサゾピロロキノリン)に神経細胞増殖因子の分泌促進活性があることなどが報告され、生理・薬理学的にも注目されている化合物である。本研究はモノクローナル抗体を用いた酵素抗体法によるPQQ、OPQの微量高感度定量法の確立を目的として行った。既に取得していた5つのPQQ特異的モノクローナル抗体のうち一つ(mAb2)は競合ELISAにおいて、本来の抗原であるPQQに対するIC_<50>は270nMであったがOPQに対しては3nMであり、これは他の11種類のPQQのアミノ酸付加体で最も低いものであった。一方、PQQを0.3MNH_4Cl,0.4%グリシン、100μMCaCl_2、pH8.3で1晩反応させると、加えたPQQのほとんどがOPQ化された。つまり、試料中のPQQをOPQ化し、その前後のOPQを定量することにより両者の高感度定量が可能となった。OPQの定量法としては現在のところ本法しか報告例はない。本法を用いていくつかの生体、食品試料中のPQQ、OPQを測定したところ、PQQに関してはこれまでの報告がかなりその濃度を高く評価し過ぎていること、発酵食品や血清中にもOPQが存在していることが判明した。ただし、生体試料中のPQQ、OPQを安定して正確に定量するためにはもう1桁感度をあげる必要があり、今後ABC法、PAP法による高感度化あるいはラジオイムノアッセイの導入を考えている。

PQQ (ピロロキノリンキノン) is the original acidification and reduction enzyme, the supplement enzyme and the acidification and reduction enzyme.が、PQQ is now used to prevent liver disease and cataracts. があること、PQQ is effective Fujia body OPQ (オキサゾピロロキノリン) secretion-promoting activity of God's cell proliferation factor The report on sex and physiology, the focus on physiology and medicine, and the compound on it. In this study, the purpose of this study was to establish the micro-volume high-sensitivity quantitative method of PQQ and OPQ using the enzyme antibody method of いた enzyme antibody. We have obtained the していた5つのPQQ specific モノクローナル antibody のうち一つ( mAb2), competing ELISA, original antigen, PQQ, IC_<50>は270nMであったがOPQに対しては3nMであり、これはhis 11 types of のPQQ のアミノ sour plus body でmost もlow いものであった. One side, PQQを0.3MNH_4Cl, 0.4% グリシン, 100μMCaCl_2, pH8.3で1濩させると, add えたPQQのほとんどがOPQ 化された.つまり, のPQQをOPQification in the sample, そのbefore and after のOPQをquantification することにより両or のhigh sensitivity quantification is possible となった. OPQ's Quantitative Method is now a report example of this method. This method is used to measure PQQ and OPQ in living organisms and food samples, and to measure PQQ and PQQ in living organisms and food samples. The presence of OPQ in the serum of fermented fermented foods and the presence of OPQ in the serum of fermented food products has been confirmed. PQQ and OPQ stability in biological samples are correct and quantitative, and the sensitivity is necessary In the future, the ABC method and the PAP method will be highly sensitive and will be introduced into the high-sensitivity method.

项目成果

成田 宏史: "モノクローナル抗体を用いたPQQ、OPQの高感度定量法の開発" バイオサイエンスとインダストリー. 51. 237-239 (1993)

Hiroshi Narita：“使用单克隆抗体开发 PQQ 和 OPQ 的高灵敏度定量方法”《生物科学与工业》51. 237-239 (1993)。