血管内皮細胞のプロスタグランディン代謝における単球の役割

单核细胞在血管内皮细胞前列腺素代谢中的作用

• 批准号: 05670541
• 负责人: 渡辺 憲太郎
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Fukuoka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670541/
• 关键词: 血管内皮細胞; プロスタサイクリン; サイトカイン; 細胞内カルシウム; トロンビン

はじめに)我々は1993年にヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)のプロスタサイクリン(PGl_2)生に対して末梢血単球で作成したconditioned mediumやサイトカインがいかなる影響を与えるかを研究し報告した(K.Watanabe et al.Mononuclear cell-conditoined medium enhances thrombin-stimulated PGl_2 production by human umbilical vein endo-thelial cells culture.Prostaglandins Leukotrienes and Essential Fatty Acids 49:675-681,1993).すなわちTNF-alpha,lL-beta,lFN-_Yなどのサイトカインは単球のconditoined mediumと同様にいずれもHUVECのPGl_2産生を促進した。今回はHUVECのPGl_2産生にいたる細胞内情報伝達機構,ことに細胞内カルシウム濃度([Ca^<2+>]_iの上昇に上述のサイトカインがいかなる影響を及ぼすかを検討した。方法)Jaffeの方法に従いHUVECを分離培養しpassage2〜3の細胞をT_<175>に植えた。Sub-confluentになった時点でTNF-alpha(200U/ml),lL-beta(10U/ml),lFN-Y(5000U/ml)などのイトカインを加えさらに24時間培養した。その後細胞を剥離しFura-2をラベルし,トロンビン刺激による[Ca^<2+>]_iの上昇を蛍光分光光度計で測定した。トロンビンは2,1,0.5,0.25,0.125,OU/mlという濃度を用いた。結果と考案)lFN-Y(5000U/ml)で前処置したHUVECはその後のトロンビン刺激による[Ca^<2+>]_iの上昇がコントロールに比して促進されていたが、TNF-alpha(200U/ml)やlL-beta(10U/ml)で前処置したHUVECはトロンビン刺激による[Ca^<2+>]_iの上昇がコントロールに比して抑えられていた。以上よりTNF-alpha,lL-beta,lFN-YなどのサイトカインはいずれもHUVECのPGl_2産生を促進するが,PGl_2産生に至る細胞内情報伝達機構,ことに[Ca^<2+>]_iの上昇に対する影響はサイトカインにより異なっており,更なる解析が必要である。

は じ め に) I 々 は 1993 に ヒ ト umbilical 帯 vein endothelial cells (HUVEC) の プ ロ ス タ サ イ ク リ ン (born PGl_2) に し seaborne 単 ball で て peripheral blood into し た conditioned medium や サ イ ト カ イ ン が い か な る influence を and え る か を study し report し た (K.W atanabe et al.Mononuclear cell-conditoined medium enhances thrombin-stimulated PGl_2 production by human umbilical vein endo-thelial cells culture.Prostaglandins Leukotrienes and Essential Fatty Acids But 3, 75-681199). す な わ ち TNF alpha, lL - beta, lFN - _Y な ど の サ イ ト カ イ ン は 単 ball の conditoined medium と with others に い ず れ も HUVEC の PGl_2 produce を promote し た. Today back to は HUVEC の PGl_2 produce に い た る intracellular 伝 intelligence agencies, こ と に intracellular カ ル シ ウ ム concentration ([Ca ^ 2 + > <] _i の rise に above の サ イ ト カ イ ン が い か な る influence を and ぼ す か を beg し 検 た. Method: Jaffe <s:1> method に従 に従 HUVECを isolation and culture of <s:1> passage2 ~ 3 <s:1> cells をT_<175>に planting えた. Sub - confluent に な っ た point で TNF - alpha (200 u/ml), lL - beta (10 u/ml), lFN - Y (5000 u/ml) な ど の イ ト カ イ ン を plus え さ ら に 24 time cultivating し た. Cells after そ の を stripping し Fura - 2 を ラ ベ ル し, ト ロ ン ビ ン stimulus に よ る [Ca ^ < 2 + >] _i の rise を 蛍 light spectrophotometer で determination し た. Youdaoplaceholder0 ビ ビ ビ ビ トロ 2,1,0.5,0.25,0.125,OU/mlと う う concentration を use トロ た. Results と test case) lFN - Y (5000 u/ml) で 処 before buy し た HUVEC は そ の after の ト ロ ン ビ ン stimulus に よ る [Ca ^ 2 + > <] _i の rise が コ ン ト ロ ー ル に than し て promote さ れ て い た が, TNF alpha (200 u/ml) や lL - beta (10 u/ml) before で 処 し た HUVEC は ト ロ ン ビ ン stimulus に よ る [Ca ^ 2 + < >] _i の rise が コ ン ト ロ ー ル に than し て え suppression ら れ て い た. Above よ り TNF alpha, lL - beta, lFN - Y な ど の サ イ ト カ イ ン は い ず れ も HUVEC の PGl_2 produce を promote す る が, PGl_2 produce に to intelligence 伝 る cell of agencies, こ と に [Ca ^ 2 + < >] _i の rise に す seaborne る influence は サ イ ト カ イ ン に よ り different な っ て お り To further なる parse が, it is necessary to である.

项目成果

K.Watanabe: "Mononuclear cell-conditioned medium enhaces thrombin-stimulated PGI_2 production by human nmbilical vein endothelial cells in cultur" Prostaglandins Leukotrienes and Essential Eatty Acids. 49. 675-681 (1993)

K.Watanabe：“单核细胞条件培养基增强人脐静脉内皮细胞在培养物中产生凝血酶刺激的 PGI_2”前列腺素白三烯和必需脂肪酸。