局所脱髄が軸索蛋白の輸送とリン酸化に及ぼす影響-脱髄後軸索変性の発症機構の解明-

局部脱髓鞘对轴突蛋白转运和磷酸化的影响 - 阐明脱髓鞘后轴突变性的发生机制 -

• 批准号: 05670547
• 负责人: 永田 博司
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670547/
• 关键词: 末梢神経; 軸索輸送; 脱髄; 細胞骨格タンパク; リン酸化

末梢神経の一部分の局所的な脱髄をきっかけとして広範な軸索変性が生じることがあり、そのメカニズムを軸索輸送の障害、輸送される軸索構成・細胞骨格タンパクのレベルで解明することが本研究目的であった。局所脱髄を引き起こす物質として塩化テルルおよび抗ガングリオシド抗体を用いて実験的部分脱髄を実験動物(ラット)で作製した。軸索変性の発症を形態学的に観察しつつ,生化学的に、アイソトープラベル法と軸索輸送される内因性酵素acethylcholinesteraseの活性を指標とし解析した。テルルにより引き起こされた脱髄部分では、腰髄前角から注入したアミノ酸を基質として合成された標識タンパクの輸送がトラップされた。抗ガングリオシド抗体を用いた脱髄モデルでも同様であった。acethylcholinesterase活性を指標とした方法でも、脱髄部分での軸索輸送の阻害を示唆する結果が得られた。また、脱髄部分とその遠位、近位の末梢神経を5mm長に細断し、ホモジナイズし、SDSポリアクルアミド電気泳動後のfluorographyにて標識された細胞骨格タンパクを分子量から同定し、非脱髄部分の末梢神経組織と比較した。脱髄部分の近位セグメントでニューロフィラメントの蓄積がみられた。また、Western blottingを行ない、リン酸化および脱リン酸化ニューロフィラメントを認識するモノクローナル抗体で検出し、脱髄部を挟む近位と遠位でのリン酸化について比較したところ、蓄積したニューロフィラメントはリン酸化されていない割合が高かった。末梢神経の部分的脱髄では、速い軸索輸送を始め、細胞骨格タンパクが運ばれる遅い軸索輸送もその部分で障害されていることが明らかになり、脱髄による二次的な軸索変性の発症機序に軸索輸送の障害が関与していることが明らかになった。

A part of the central nervous system is isolated from the central nervous system, and the axonal transport is impaired. The axonal structure of the central nervous system is analyzed. The enzyme is used to control the partial enzyme release of the enzyme. Axonal development is characterized by morphological observation, biochemical analysis, and activity of acetylcholinesterase, an endogenous enzyme in axonal transport. In addition to the above, the present invention also provides a method for preparing and synthesizing a polymer. The anti-virus antibody is used in the same way. Acethylcholinesterase activity was measured by the method, and the results showed that the axial transmission resistance of the free part was decreased. The distal and proximal parts of the brain were cut off in 5mm length, and the fluorescence of the distal and proximal parts of the brain was compared with the fluorescence of the distal and proximal parts of the brain. The accumulation of the degenerated part of the body is not easy. In addition, Western blotting can be used to detect and detect the presence of antibodies in the vicinity and in the distant region. In addition, the mechanism of axonal development is related to the impairment of axonal transport.