ヒト膀胱癌に見い出された転移関連糖蛋白質に関する臨床的・分子生物学

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ヒト膀胱癌組織及び膀胱癌培養細胞Boyより抽出したm-RNAを用い、cDNAを作成、パツケージングしてlambdagt10及びlambdagt11によるcDNAライブラリーを作成した。スクリーニング:培養細胞を大量培養しMM4抗体を用い、抗体と結合する蛋白を抽出し、プローブを得ようと試みたが、蛋白が微量しかとれず、N末アミノ酸組成を決定するに至らなかった。止むおえず、ランダムプライマーより作成したlambdagt11cDNAライブラリーをMM4抗体を用いてスクリーニングし、60bpと350bpの2本のcDNAフラグメントを得た。このうちの350bpのcDNAフラグメントを使用し、スクリーニングを進めた現在まで、coding regionを含む1.6kbpがsequencingされたが、既知のmoleculeとは今のところ別の組成のものと考えられる。現在5′側の未決定のcoding regionをcloningするべく研究を続行中である。又、抗体によりスクリーニングされたもう一つのcDNAフラグメントはDNA配列をシークエンスしたところまったく別のものであった。このフラグメントは癌部にRNAレベルで著明に発現しており、約2.7kbの大きさである。こちらについてもクローニングするべくスクリーニングに入ったところである。又、癌細胞と転移宿主との接着因子についても既知の接着分子であるカドヘリン、インテグリン、セレクチンについて膀胱癌の転移巣での発現の有無と、我々が抽出した60kDの癌細胞側のcore proteinとの関連についても免疫組織学的手技、ウエスタンブロッテイングなどにて検討中である。