权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

酸素添加酵素を用いた有用化合物の不斉合成

使用加氧酶不对称合成有用的化合物

基本信息

批准号：
07650963
负责人：
田中修司
金额：
--
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.ドーパミン β-ヒドロキシラーゼ(DBH)による不斉合成DBHは、生体内においてdopamineのベンジル位を不斉に酸化しnorepinephrineを生成する。本酵素および化学修飾により安定化したPEG-DBHの新たな電子伝達系を構築し、活性発現について検討した結果、本酵素とferrocene誘導体からなるハイブリッドタンパク質が電極と電子の授受を行い効率的に酵素活性を発現することを見いだした。DBHおよびPEG-DBHの有用化合物合成への適用範囲を探るため、基質特異性について検討した。本酵素はphenylalkylamine化合物やphenylalcohol化合物を不斉に酸化しR体の光学活性アルコールを生成した。また、基質のヘテロ原子上に種々の置換基を導入した結果、phenylalkyl誘導体については、alkyl末端に水素結合において水素供与体なり得るようなヘテロ原子をもつ化合物が本酵素の基質となることが明らかとなった。さらに、indanなどの2環化合物について検討した結果、芳香環のβ位にアミノ基や水酸基をもつ化合物が基質となり、酵素により導入された水酸基の立体選択性はphenylalkyl化合物と異なりS体であった。このことから、本酵素の活性中心の構造が推定された。2.シトクロームP450camの新たな活性発現系の再構成天然では活性発現に複雑な電子伝達系を必要し、そのため合成化学への利用が困難であったシトクロームP450cam(P450)の電子伝達系の再構成について検討した。P450と電極との直接の電子授受は観測されなかったが、putidaredoxinを電極上に化学的に固定化したタンパク質修飾電極を用いることで、電極とP450の間で電子の授受が起こった。また、本系に基質を加えると、触媒電流が観測されることから、本系が新たなP450活性発現系であることは明らかである。今後は、より効率的な電子伝達系を再構成し、本酵素による合成化学的な応用を図る。

1. The synthesis of DBH in the presence of dopamine and norepinephrine in vivo. The enzyme was chemically modified to stabilize PEG-DBH and to develop new electron transfer systems. DBH and PEG-DBH are useful in the synthesis of chemical compounds. The enzyme produces phenylamine compounds and phenylalcohol compounds without acidification and optical activity. As a result of the introduction of substitutional groups on the substrate atoms, phenylalkyl inducers, alkyl termini, and water donors, compounds that are substrates for the enzyme are clearly identified. In addition, indan and 2-ring compounds were studied. The results showed that the β-position of aromatic ring was not changed, and the hydrolysis group was not changed. The stereoselectivity of hydrolysis group was not changed. The structure of the active center of this enzyme was presumed. 2. Reconstructing the new active discovery system of P450 cam is necessary for the complex active discovery system, and it is difficult to utilize the synthetic chemical system. P450 and P450 electrodes are chemically immobilized on the electrode, and P450 and P450 electrodes are chemically modified. This system is a new P450 active development system. In the future, efficient electron transport systems will be reconstituted and the use of synthetic chemistry for this enzyme will be enhanced.