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ジャガイモYウイルスに対する抗ウイルス剤の開発

马铃薯Y病毒抗病毒剂的研制

基本信息

批准号：
07660096
负责人：
日高真誠
金额：
$ 1.41万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1)ジャガイモYウイルス(PVY)のNIaプロテアーゼに対する阻害活性物質のスクリーニング大腸菌の生死を指標とするスクリーニング系を用い、約2000株の土壌分離微生物の培養上清をアッセイした結果、形態的に5種類に分類できる12株のグラム陽性桿菌に阻害活性が認められた。最も強い阻害活性を示した菌(R27株)は、鹿児島湾の水深約150mの海底土壌から分離された菌で、Bacillus属細菌と考えられる菌であった。2)NIaプロテアーゼ阻害物質の単離と構造解析上記12株の生産する阻害物質の各種クロマト担体に対する吸着性は、大きく3種類に分かれた。特にR27の生産する物質は、陽イオン交換樹脂に吸着し、各種有機溶媒にほとんど溶解しないという特徴を示した。そこでさらにセルロースTLC等を組み合わせて本物質を単離し、NMRとMSにより構造を解析し結果、3-amino-3-deoxyglucose(3AG)であった。3)3AGのPVYの増殖に対する抑制効果タバコ(Nicotiana tabacum cv.Samsun NN)にPVYを接種して発病させ、そこに3AGを噴霧したところ、病徴の大幅な軽減が認められた。またそのタバコに蓄積されているPVYの量は、3AG無噴霧の場合のものと比較して60分の1以下に減少していた。このことより、3AGはPVY増殖抑制活性を持つと結論できる。

1) NIa-positive bacteria of PVY (PVY) were used as indicators of life and death of E. coli. About 2000 strains of soil isolated microorganisms were cultured in supernatant. Results and morphology of NIa-positive bacteria of PVY (PVY) were classified into 5 species and 12 strains were identified as having inhibitory activity. The most active bacteria (R27 strain) were isolated from the bottom soil of Kagoshima Bay at a depth of about 150m. 2) The structure analysis of NIa inhibitor was recorded in 12 strains, and the adsorption properties of various inhibitors were classified into 3 types. The production of R27 is characterized by adsorption on cation exchange resins and dissolution in various organic solvents. The structure of this substance was analyzed by TLC, NMR and MS, and 3-amino-3-deoxyglucose (3AG) was determined. 3) The growth of PVY was inhibited by Nicotiana tabacum cv.Samsun NN. The amount of PVY accumulated in the air decreased from 60 minutes to 1 minute compared with that in the case of no spray. 3AG and PVY growth inhibition activity were determined.