出芽酵母におけるG2期チェックポイント機構の解析

酿酒酵母G2检查点机制分析

• 批准号: 07660113
• 负责人: 土屋 英子
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07660113/
• 关键词: チェックポイント機構; 細胞周期; Sr cerevisial; 核蛋白

細胞周期の進行はゲノムDNAの複製とその娘細胞への分配の過程を直接進行させる一連の機構と、この過程の正確さをチェックする機構が協調して働くことによって成立すると考えられる。後者の機構はチェックポイント調節と呼ばれ、DNA複製開始前、およびゲノム分配の前にDNAの損傷や複製の完了をチェックし、細胞周期を停止させるように働く。この機構は細胞の癌化や、癌化した細胞で観察される染色体異常等と深く係わっていると考えられ大きな興味が持たれている。我々がクローニングした出芽酵母の遺伝子NPS2(HND1)は、推定分子量役190Kの核蛋白をコードし、DNA合成阻害剤のヒドロキシウレアや、UV照射等に感受性というチェックポイント機構に欠損を持つ変異株と同様の表現型を示し、この機構に関する新しい遺伝子と考えられた。本研究はNPS2の機能解明を目的として実施し、以下の結果を得た。1)NPS2破壊株を同調培養し、細胞周期の各時期でのDNA損傷に対する感受性を比較した結果、G1/S期における感受性は野菜株と同等であるが、G2/M期での感受性が増大することが明らかになり、本遺伝子はG2/M期のチェック機構に係わる事を明らかにできた。2)MPS2破壊をhomoに持つ2倍体は胞子形成培地中で2回の核分裂の後、核の崩壊を起こして死滅することを見いだし、本遺伝子は減数分裂過程に必須なものであることを明らかにした。3)nps2変異株はG2/M期に必須な遺伝子MPS1の高発現に依存して成育用区政を受ける。NPS1とNPS2との機能的関連を明らかにするため、two hybridシステムによる解析を行った結果、両蛋白間には直接の相互作用はないが、Nps1pは何らかの転写因子と結合しうること、この結合をNps2pが細胞周期依存的に調節している事を示す結果を得、現在、当該因子のクローニングを試みている。

Cell cycle progression requires direct DNA replication and cellular distribution, and the mechanisms involved in the process are coordinated. The latter mechanism is regulated by the cell cycle, before DNA replication begins, before DNA distribution, before DNA damage, after DNA replication is completed, and before cell cycle stops. The mechanism of this disease is cancer, cancer, chromosome abnormality, etc. The budding yeast gene NPS2(HND1) is a putative nuclear protein with a molecular weight of 190K. It is sensitive to DNA synthesis inhibitors, UV irradiation, etc. The purpose of this study is to clarify the function of NPS2. The following results are obtained. 1) Comparison of susceptibility to DNA damage at different stages of the cell cycle, G1/S stage, G2/M stage and G2/M stage. 2) MPS2 breaks down, homo, diploids, sporogenesis, and meiosis. 3) NPS2 mutants are required for the high development of MPS1 in G2/M phase and are dependent on the development of regional government. The functional relationship between NPS1 and NPS 2 is revealed in the analysis of results, direct interactions between proteins, binding of Nps1 and Nps2 to cell cycle-dependent regulation.

项目成果

Hemmi, K. et. al.: "The physiological roles of membrane ergosterol as revealed by the phenotypes of syr1/erg3 null mutant of Saccharomyces cerevisiae." Biosci. Biotech. Biochem.56. 482-486 (1995)

海米，K.等。

Farcasanu, I. C. et. al.: "Protein phosphatase 2B of Sacharomyces cerevisiae is required for tolerance to manganase, in blocking the entry of ions into the cells." Eur. J. Biochem. 232. 712-717 (1995)

Farcasanu，I.C. 等。

Tsuchiya, E. et. al.: "The Saccharomyces serevisiae SSD1 gene is involved in the tolerance to high concentration of Ca with the participation of HST1/NRC1/BRF1." Gene. (印刷中). (1996)

Tsuchiya, E. 等人：“酿酒酵母 SSD1 基因在 HST1/NRC1/BRF1 的参与下参与了对高浓度 Ca 的耐受（正在出版）。”