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細胞周期における核構造一染色体間のダイナミックスの解析

细胞周期过程中核结构和染色体间动力学分析

基本信息

批准号：
10159212
负责人：
土屋英子
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10159212/
关键词：
核蛋白 S.cerevisiae NPS1 STH1 減数分裂クロマチン構造

项目摘要

出芽酵母のNps1Pはヌクレオソームのリモデリングを介して複数の遺伝子の転写調節に働くことが明らかにされたSWI/SNF複合体の主要サブユニットであるSnf2pと相同性を持つ分子量約160KのG2/M期の進行に必須な核蛋白である。我々は、RSCの機能解析を目的としてNPS1の温度感受性変異株を2株分離し、これらの株の解析により、Nps1pあるいはRSC複合体が、増殖に伴うセントロメア等の染色体の特定部位での染色体高次構造の形成・維持に働いている事を明らかにできた。しかし、Nps1pは核全体に存在することから、さらに広い機能を持つ事が予測される。今回、我々はNPS1の温度感受性変異をホモに持つ2倍体が胞子形成に欠損を持つことを見いだした。変異株では胞子形成前DNA合成も顕著に遅延していたことから、この欠損は減数分裂開始後のごく初期に起こっていることが解った。そこで、減数分裂初期に転写誘導を受ける遺伝子について、変異株での発現を解析した結果、最も初期に誘導される転写因子をコードするIME1の転写はほぼ正常に起こるものの、IME1で転写活性化を受けるIME2,SPO11.SPO13の転写が極めて低下していた。このうち、IME2はプロテインキナーゼをコードし、SPO11,SPO13転写を正に調節することが知られている。従って、変異株における減数分裂初期遺伝子群の転写量の低下には、IME2の転写の欠損が最も大きな影響を与えていると考えられた。そこで、IME2上流の切り詰めを行い、nps1変異によって転写誘導に低下の生じる配列の同定を行った。この結果、nps1変異は、転写因子Ime1pの作用配列であるURS1を介した活性化を低下させることが解った。URS1配列には、DNA結合蛋白であるUme6pが結合し、体細胞分裂時にはこれにコレプレッサーSin3p、ヒストン脱アセチル化酵素Rpd3pが結合しており、この配列は転写抑制配列として機能するが、減数分裂期にはUme6p上にIme1p.Rim11pが結合して転写活性化配列として働く。URS1配列は、減数分裂初期遺伝子以外にも、INO1を始めとする数種の遺伝子の転写抑制に働いている。そこでnps1変異がINO1の転写誘導にも作用するかを調べたが、野生型の場合と変化は認められなかった。我々は、NPS1遺伝子自身の転写も減数分裂開始のごく初期に活性化されることを見いだしており、上述の本遺伝子の機能は、減数分裂時に特異的なものであると考えられた。

Np1p is the most important component of the SWI/SNF complex, and its molecular weight is about 160K, which is necessary for the development of G2/M phase. For the purpose of functional analysis of RSC, two temperature-sensitive mutants of NPS1 were isolated and analyzed, and Nps1 p was isolated from RSC complex, and the formation and maintenance of chromosome high-order structure in specific parts of chromosomes were analyzed. Nps1p is the core of the whole system. This time, I have seen the difference in temperature sensitivity of NPS1 and the lack of loss in cell formation due to diploidy. DNA synthesis begins at the beginning of meiosis before spore formation. In addition, during the early stage of meiosis, the induction of transcription factors was detected, and during the early stage of meiosis, the induction of transcription factors was detected. In IME1, the induction of transcription factors was detected, and in IME1, the activation of transcription was detected. In IME2, SPO11, SPO13, the transcription factors were detected. This is the first time I've ever seen a person who's been in a relationship with someone else, and I've never seen a person who's been in a relationship with someone else. The decrease of the number of chromosomes in the early meiotic stage of the mutant plants is the greatest influence on the number of chromosomes in the early meiotic stage of the mutant plantsそこで、IME2上流の切り诘めを行い、nps1変异によって転写诱导に低下の生じる配列の同定を行った。The result is that nps1 is different, and the action of the writing factor Ime1p is different. URS1 alignment, DNA-binding protein Ume6p binding, somatic cell division, reverse transcription of Sin 3p, reverse transcription of Rpd 3p binding, this alignment inhibition ligand function, meiosis, Ume6p, Ime1p.Rim11p binding, reverse transcription activation ligand. URS1 alignment, early meiotic inheritance, INO1 initiation, and several genetic inheritance inhibition. In the case of wild type, the expression of INO1 is different from that of NPS1. The NPS1 gene itself is activated at the beginning of meiosis, and the function of the gene is specific at meiosis.