グリセロ糖脂質の高感度絶対配置決定法の開発研究

高灵敏甘油糖脂绝对构型测定方法的研发

• 批准号: 07660129
• 负责人: 西田 芳弘
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07660129/
• 关键词: 不斉誘導体化; ケイ光性試薬; 糖グリセリド; 立体配置; 高速液体クロマトグラフィー; HPLC分析

本研究の目的は、動植物の細胞壁に広く存在する糖グリセリドの絶対配置を、極微量に決定する方法を確立する事である。これまで、旋光度や円偏向二色性スペクトル法などが報告されているが、天然に存在する糖グリセリドは微量であり、しかも、スペクトル分析の試料とするには、精密な精製、並びに絶対配置既知のモデル化合物が必要であるなどの問題が指摘されていた。先に、我々は、光学活性アルコール、アミンの絶対配置並びに光学純度を微量の試料で決定するための蛍光性不斉誘導体化試薬、(S)-TBMBカルボン酸を開発する事に成功している。本研究では、糖グリセリドのグリセロール部位の絶対配置を本試薬で決定する方法の開発を試みた。以下にその結果と成果をまとめた。1)グルコースと市販の(S)-グリシドールから、絶対配置既知のグルコシルグリセリドを立体選択的に合成する方法を確立し、これをモデル化合物に用いて分析法の開発を試みた。2)糖グリセリドのグリセロール部位を立体配置保持のままキラルグリセロール誘導体に導く方法を検討し、アシル基のアルカリ加水分解、完全メチル化、グリコシル結合の酸加水分解についてを含むスキームを考案し、各段階における最適条件を設定する事ができた。3)上述法により得られた光学活性グリセロールを(S)-TBMBカルボン酸によりラベル化し得られるジアステレマ-を順相系HPLC条件によって相互分離する条件を設定した。4)モデル糖グリセリドを用いて、(2)と(3)の操作法をさらに最適化し、目的とする糖グリセリド分析法を確立する事に成功した(別紙論文1、2)。本分析法は、0.05ピコモル量の検出感度で分析でき、これにより、極微量の試料で確実に、糖グリセリドグリセロールの絶対配置の分析が可能となった。さらに、糖部位の絶対配置を決定する方法も同時に確立し(文献3)、これにより、糖グリセリドん分子全体の絶対構造解析法が確立された事になる。

The purpose of this study is to establish a method for determining the amount of sugar and dust in the cell wall of animals and plants This is a problem that arises from the determination of trace amounts of sugar, which is naturally present in the sample, from the determination of trace amounts of sugar, from the In the first place, we successfully developed the optical activity, optical purity and optical purity of the sample. This study aims to explore the development of a method for determining the relative position of sugar in the sugar chain. The following results were achieved. 1) Establishment of a method for the synthesis of stereoselective compounds from known (S)-derivatives, and development of analytical methods for these compounds. 2)A method for the preparation and maintenance of three-dimensional dispositions of sugar groups and their inducers is discussed. The optimal conditions for the preparation and maintenance of three-dimensional dispositions of sugar groups and their inducers are discussed. The optimal conditions for the preparation and maintenance of three-dimensional dispositions of sugar groups and their inducers are discussed. 3)The above method was used to determine the optical activity of the compound. 4) The operation method of (2) and (3) was successfully established for optimization and purpose of sugar extraction analysis (Paper 1 and 2 respectively). This analysis method is based on the sensitivity analysis of 0.05 μ g/ml, the accuracy analysis of the sample with small particle size, and the analysis of the isolation configuration of the sample with small particle size The method for determining the absolute position of the sugar site was established simultaneously (Reference 3).

项目成果

Y.Nishida: "Determination of the Absolute Configuration and the Conformation of Carbohydrtae Molecules Based on Analytical Organic Chemistry" Tohoku J. Afric. Res.46. 73-91 (1995)

Y.Nishida：“基于分析有机化学的碳水化合物分子的绝对构型和构象的测定”Tohoku J. Afric。

C. Bai, Y. Nishida他2名: "A Highly Sensitive HPLC Method to Discriminate Enantiomeric Amino Deoxy Sugars Based on Derivatization with (S) -TBMB Carboxylic Acid" J. Carbohydr. Chem.15 (2)印刷中. (1996)

C. Bai、Y. Nishida 和其他 2 人：“基于 (S)-TBMB 羧酸衍生化的高灵敏度 HPLC 方法来区分对映体氨基脱氧糖”J. CarboHydr.15 (2)，已出版。 ）

J.Kim,Y.Nishida他2名: "A Highly Sensitive HPLC Method to Determine the Absolute Configuration of Glycosyl Glycerols Using A Fluorescent Chiral Derivatizing Agent" J. Carbohydr. Chem.14. 889-893 (1995)

J. Kim、Y. Nishida 和其他 2 人：“使用荧光手性衍生剂测定糖基甘油的绝对构型的高灵敏度 HPLC 方法”J. CarboHydr.14 (1995)。