卵巣顆粒膜細胞/黄体細胞の分化抗原の同定とその解析

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卵胞および黄体の主要構成細胞である顆粒膜細胞と莢膜細胞は、卵胞発育、卵胞閉鎖、黄体形成および黄体退縮にともなって、自ら増殖、分化、細胞死を周期的に繰り返す極めて特徴的な内分泌細胞である。本課題において、我々は卵巣顆粒膜細胞に着目し、広く細胞生物学に適用出来る細胞の増殖、分化の新たな制御機構の一つのモデルを確立するため、顆粒膜細胞と黄体細胞の新たな分化抗原を単クローン抗体作成法を利用して同定、解析した。本年度、明らかにしたことは、ヒト顆粒膜細胞を抗原として作成した幾つかの単クローン抗体の一つで同定された、顆粒膜細胞の分化抗原であるOG-1抗原をヒト胎盤組織よりインムノアフィニティー法を利用して精製し、SDS-PAGEにより120KDaの単一バンドを得た。この120KDaバンドをPVDF膜に転写しアミノ酸分析装置によりN末端からのアミノ酸配列を分析したところN末からの16個のアミノ酸がインテグリンα6の重鎖のそれと同一であることが明らかとなった。インテグリンα6はインテグリンβ1、β4分子とヘテロダイマーを形成することから、α6、β1、β4分子の組織分布を調べた。その結果、それらの発現様式は卵巣組織でのOG-1の発現とよく相関し、α6とOG-1の分子量もほぼ同じであることから、OG-1抗原はインテグリンα6分子であると結論した。OG-1とは独立に作成した。ブタ顆粒膜細胞に対する単クローン抗体の一つにより認識される分化抗原であるPOG-2抗原も抗原精製し、N末からのアミノ酸配列を調べたところ、16個のアミノ酸中14個はインテグリンα6と同一であり、分子量も近似していることから、POG-2分子もブタのインテグリンα6と結論した。インテグリン分子は細胞増殖、分化の制御に重要な役割を果たしていることが近年、幾つかの細胞系で指摘されてきており、現在、上記の系で検討中である。