心筋虚血・再灌流時の心筋細胞障害に関する研究。

心肌缺血/再灌注过程中心肌细胞损伤的研究。

• 批准号: 07670757
• 负责人: 池ノ内 浩
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670757/
• 关键词: 心筋虚血; 早期遺伝子; MAPkinase; adrenomedullin; NO; cGMP; NOS; 内向きカルシウム電流

1.虚血再還流時の早期遺伝子の発現の検討:10日目の鶏胚単離培養心筋細胞を用い代謝阻害(1mM.NaCN,20mM.2deoxy-glucose,30min)回復過程の早期遺伝子mRNAの発現を検討した。c-fos.mRNAは回復期30,60minで一次的に発現した。c-jun,mRNAは回復期30-120minで1.9-4.7倍に増加、c-myc.mRNAも同様に1.4-1.7倍に増加した。AP-1.DNA結合能をelectrophoretic mobility shift assayで調べたところ、回復期120minで著明に増加していた。あらかじめ細胞をprotein kinase C阻害薬で処理しておくと回復期60minにおけるc-jun.mRNAの発現は著明に抑制され、またEGTAの添加でも部分的に抑制された。In-gelkinase assayにより測定したMAP kinase活性は回復期早期(5-15min)に3.0-4.1倍に増加していた。S6 kinase活性も回復期15minに有意に増加していた。これらより、早期遺伝子およびMAP kinaseが虚血回復過程において何らかの役割を果していることが示唆された。またc-junの発現にはprotein kinase Cの活性化、[Ca^<2+>]iが関与していることが認められた。(J.Clin Invest 1995,96:69-77)2.アドレノメデュリンの心筋直接作用の検討:虚血再還流時には様々な体液因子が重要な役割を果たしている。最近、褐色細胞腫から抽出同定された血管拡張性ホルモン、アドレノメデュリンは、心筋梗塞患者、心不全患者でその血中濃度の上昇が認められ、心筋細胞内にmRNAが確認されており、心臓において何らかの生理的役割を果たしている可能性が示唆されている。そこで我々はこのホルモンの心筋収縮性に対する直接作用とその機序を検討した。アドレノメデュリンは成兎単離心筋細胞に対し陰性変力作用を示し[Ca^<2+>]iを低下させた。この作用はNOSの活性化、細胞内cGMPの上昇を介し内向きカルシウム電流の減少を伴っていた。これらより、アドレノメデュリンは心筋細胞内でNOを介して[Ca^<2+>]i動態、心収縮能を修飾してい可能性が示唆された。

1. Detection of early gene expression during hypovolemic reperfusion: Detection of early gene mRNA expression during the recovery process in cultured cardiac muscle cells from embryos isolated on day 10 with metabolic inhibition (1mM NaCN,20mM 2deoxy-glucose,30min). c-fos.mRNA appeared only once in 30,60min of recovery period. c-jun mRNA increased by 1.9-4.7 fold at 30-120min, and c-myc mRNA increased by 1.4-1.7 fold at 30 - 120 min. AP-1. DNA binding energy is increased by electrophoretic mobility shift assay and recovery period of 120min The expression of c-jun.mRNA was inhibited by protein kinase C inhibition in the 60min recovery period, and EGTA was added to the cells. MAP kinase activity increased by 3.0-4.1 fold in the early recovery period (5-15min). The recovery period of S6 kinase activity was 15min, which was intentionally increased. The early stages of the process of blood loss recovery are related to MAP kinase. c-jun protein kinase C activation,[Ca^<2+>]i, and c-jun protein kinase C activation. (J.Clin Invest 1995, 96:69-77)2. A study of the direct effects of serum humoral factors on cardiac muscle: the effects of serum humoral factors on the recovery of deficient blood. Recently, brown cell tumors have been extracted from the same blood vessels, such as hypertonia, myocardial infarction, and cardiac insufficiency. The increase in blood concentration has been recognized. mRNA in cardiac muscle cells has been confirmed. The possibility of physiological injury has been demonstrated. This paper discusses the mechanism of direct interaction between the two groups. The effect of negative force on the growth and development of centrifugal muscle cells is shown in [Ca^<2+>]i. This action is mediated by NOS activation and intracellular cGMP increase, accompanied by a decrease in inward currents. In addition, it is possible to modify the dynamics and contractions of NO in cardiac muscle cells.

项目成果

A Yao,T Takahashi,et al: "Immediate-early gene induction and MAP kinase activation duringrecovery from metubolic inhibition in cultured cardiac myocytes." Journal of Clinical Investigation. 96. 69-77 (1995)

A Yao、T Takahashi 等人：“培养的心肌细胞从代谢抑制恢复过程中的立即早期基因诱导和 MAP 激酶激活。”

H.Ikenouchi,et al: "Negative inotroric effects of adrenomedullin are associated with decreased [Ca^<2+>]i,and ICa、mediated by nitric oxide in isolated adult rabbit Cardiac myocytes" Circulation. 92. I433- (1995)

H. Ikenouchi 等人：“肾上腺髓质素的负向肌力作用与分离的成年兔心肌细胞中一氧化氮介导的 [Ca ^ 2+ ] i 和 ICa 减少有关”循环。