心筋虚血再灌流障害に対する抗接着分子療法の確立および心筋細胞応答の分子機構の解析

心肌缺血再灌注损伤抗粘连分子治疗的建立及心肌细胞反应的分子机制分析

基本信息

批准号：
07670761
负责人：
世古義規
金额：
$ 1.54万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.(1)心筋虚血再灌流障害に対する抗接着分子療法の効果を確立するため、ラットの左冠動脈を30分間結紮後解除することにより心筋虚血再灌流モデルを作成し、selectin familyの接着分子のligandである糖鎖のsialyl-Lewis^X(SLEX)に対する抗体をin vivoに投与したところ、全心筋組織に対する心筋壊死巣の割合は、コントロール群に対して有意の減少が認められた。このことから、心筋虚血再灌流により比較的短時間のうちに心筋細胞や血管内皮細胞上に発現誘導されるSLEXは、好中球によるselectinを介する接着・心筋障害に重要な役割を果していると考えられ、抗SLEX抗体のin vivo投与は虚血再灌流障害の予防に有効であると考えられた。(2)また、合成SLEX分子の心筋虚血再灌流障害に対する効果を検討したところ、有効であることを確認した。(3)さらに、Na^+-H^+ antiporter阻害薬のin vivo投与による著明な再灌流障害抑制効果も確認した。2.心筋虚血再灌流障害のin vitroのモデルとして、ラットの培養心筋細胞に低酸素負荷および低酸素負荷後再酸素化刺激を行ない、細胞内情報伝達系の賦活化を解析した。低酸素刺激および低酸素負荷後再酸素化刺激によってp21^<ras>→Raf-1キナーゼ→MAPキナーゼ・キナーゼ→MAPキナーゼ→S6キナーゼという一連のリン酸化カスケードおよびP13がキナーゼ活性化することを明かにした。また、細胞が細胞外基質に接着する時に重要なfocal adhesionに関連するチロシン・キナーゼ(FAK、paxillin)やRac1キナーゼの下流にあってストレス反応で重要な経路(p65^<PAX>)がこれらの刺激によって活性化することも明かにした。さらに、低酸素刺激によるこれらの細胞内情報伝達系の賦活化は、Src familyのチロシン・キナーゼの活性化によって分泌される成長因子によって媒介されていることを明かにした。

1。（1）为了建立抗粘附分子疗法对心肌缺血 - 再灌注损伤的影响，通过将大鼠的左冠状动脉连接30分钟，然后释放出抗体抗体，从在体内给药，在对照组中，心肌坏死灶与总心肌组织的比例显着降低。由此，SLEX在相对较短的时间内通过心肌缺血 - 再生灌注在相对较短的时间内在心肌细胞和血管内皮细胞上表达，在选择素介导的粘附和心肌损伤中，在中性粒细胞中受到了重要的作用，在中性粒细胞的心肌损伤中起着重要的作用，而在体内施用了抗Slex抗体的施用抗体抗体受到了侵害。（2）我们还研究了合成SLEX分子对心肌缺血 - 再灌注损伤的影响，并确认其有效。（3）此外，我们还证实了在体内施用Na^+-H^+抗胞菌素抑制剂的显着抑制作用。 2.作为心肌缺血 - 再灌注损伤的体外模型，培养的大鼠心肌细胞受到缺氧和缺氧负荷后的重氧刺激，并分析了细胞内信号传导系统的激活。结果表明，进行缺氧后缺氧和重氧刺激激活一系列磷酸化级联反应的激酶：p21^<RAS>→RAF-1激酶→MAP激酶 - 激酶→MAP激酶→MAP激酶→S6激酶和P13。他们还揭示了这些刺激激活酪氨酸激酶（FAK，Paxillin）和应力反应中的重要途径（p65^<pax>），它们与局灶性粘附相关，当细胞粘附在细胞外基质上时，这一点很重要。此外，他们透露，缺氧对这些细胞内信号系统的激活是由SRC家族酪氨酸激酶激活分泌的生长因子介导的。