サイトカイン・抗体フラグメント複合体による免疫放射線治療の向上の試み

尝试使用细胞因子/抗体片段复合物改进免疫放射治疗

• 批准号: 07671009
• 负责人: 木村 良子
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07671009/
• 关键词: IL-2; 放射免疫治療; 抗体フラグメント

方法:腫瘍細胞株SCC-3とこれに対する単クローン抗体YK-1抗体モデルを使用。抗体は、ハイブリドーマを接種したヌードマウス腹水より、プロテインGカラムにて精製。F(ab´)2は、抗体のペプシン処理にて作成。rhIL-2をSPDP処理後、F(ab´)を2-メカルプトエタノール処理にて作成したFab´と反応させrhIL-2-Fab´を作成した。IL-2活性の測定には、マウスの脾細胞をPHA刺激し、洗浄後、各段階の処理IL-2反応物を添加培養し、2日後のH-3-チミジン取り込みで測定した。抗体のRI標識は、サイクリックDTPA無水物法にて作成したDTPA抗体結合物にIn-111を標識した。側腹部に腫瘍を移植したヌードマウスに、rhIL-2-Fab´またはFab´とrhIL-2を腹腔内投与、1時間後に標識抗体を腹腔内投与し、2日目、4日目に屠殺、各臓器の放射活性を測定し、体内分布を計算した。結果:培養細胞での検討で、IL-2のSPDP処理により、IL-2活性は、元の約70%に低下した。rhIL-2-Fab´のIL-2活性はIntact IL-2 1μgに相当するのは、50-80μgであった。ファルマシア社Recombinant Phage Antibody SystemによるFv作成は、有効なFvが得られなかった。ヌードマウスに、(1)rhIL-2-Fab´ 50μg投与群、(2)rh-IL-2 1μg及びFab´ 50μg投与群、(3)PBS投与群での体内分布は、(3)に比べて(2)群では腫瘍の集積率は1.1〜1.3倍に増加したが、正常臓器(肝、肺、筋肉)への集積も上昇傾向がみられた。(1)群では、腫瘍への集積率が1.0〜1.4倍に増加し、正常組織への集積は有意差はみられなかった。考察:フラグメント化した抗体IL-2結合物による、血管透過性亢進の試みは、腫瘍における腫瘍集積を特異的に増加させ、放射免疫療法の補助手段として有用であると思われる。

Methods: SCC-3 and YK-1 antibody were used in this study. Antibodies are purified by inoculation. F (ab) 2 is produced by the process of antibody selection. rhIL-2 is treated with SPDP, F (ab) is produced from 2-mer solution, and rhIL-2-Fab is produced from 2-mer solution. IL-2 activity was measured by PHA stimulation, washing, and treatment of IL-2 reaction. Antibody RI identification: In-111 identification of DTPA antibody conjugate prepared by DTPA anhydrous method rhIL-2-Fab and rhIL-2 were injected intraperitoneally, 1 day later, labeled antibody was injected intraperitoneally, 2 days later, 4 days later, radioactivity of each organ was measured, and in vivo distribution was calculated. Results: IL-2 activity decreased by 70% in SPDP treatment. IL-2 activity of rhIL-2-Fab was comparable to that of Intact IL-2 at 1 μ g, 50 - 80 μ g, respectively. The Recombinant Phage Antibody System is designed to be able to detect the presence of Fv. (1) rhIL-2-Fab '50 μ g administration group,(2) rh-IL-2 1 μ g and Fab' 50 μ g administration group,(3) PBS administration group,(3) Compared with the control group,(2) The accumulation rate of tumor increased by 1.1~1.3 times, and the accumulation rate of normal organ (liver, lung, muscle) increased. (1)The accumulation rate of tumor tissue increased by 1.0~1.4 times, and the accumulation rate of normal tissue increased by 1.0~1.4 times. To investigate the effects of anti-IL-2 conjugates, vascular permeability test, tumor accumulation, specific enhancement, and complementary means of radioimmunotherapy.