マウスミニサテライト遺伝子座を用いた放射線誘発生殖細胞突然変異のモニター系の開発

使用小鼠小卫星位点开发辐射诱导的生殖细胞突变监测系统

• 批准号: 07680582
• 负责人: 神谷 研二
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07680582/
• 关键词: ミニサテライト遺伝子; 生殖細胞突然変異; 放射線; RBE; 精子細胞期; マウス

C3H/Heの雄マウスに放射線を照射し、これにC57BL/6Nの雌マウスを照射直後、3週間後および11週間後の各々の時期に1週間の間交配した。これらの交配により生まれたF1マウスは、父親の生殖細胞が精子期、精子細胞期および精原細胞期の時期に放射線照射を受けて生まれた子供となる。放射線の線源は^<60>Coγ線を用い、その線量は0Gy,1.0Gy,2.0Gy,3.0Gyとした。これらのマウスtailよりDNAを抽出し、サウザン法を用いてミニサテライト遺伝子Pc-1の変異を解析した。精子細胞期の生殖細胞が放射線照射に対し最も感受性が高く、その突然変異率と線量との間に線量・効果関係を認めた。この場合のPc-1遺伝子座の父親側alleleの突然変異率は、0Gy,1.0Gy,2.0Gyおよび3.0Gyの照射に対し、それぞれ9.1%,22%,28%,および28%であった。同様の実験を、^<252>Cf中性子を用いて行った。γ線の場合と同様、精子細胞期の生殖細胞が^<252>Cf中性子照射による突然変異の誘発に最も強い感受性を有した。この時の^<252>Cf照射による父親側alleleのPc-1遺伝子の変異率は、線量0.35,0.7および1.02Gyに対し、18%,26%および24%であった。Pc-1遺伝子座における^<252>Cf照射による変異誘発のγ線に対するRBEを計算すると、精子期、精子細胞期、および精源細胞期でそれぞれ5.9,2.6,および6.5であった。以上のことから、われわれはミニサテライトPc-1の生殖細胞での変異をサウザン法により定量化することにより、放射線による生殖細胞突然変異を調べるモニター系が開発できたと考える。

C3H/He males were exposed to radiation, C57BL/6N females were exposed to radiation, 3 weeks later, 11 weeks later, and 1 week later. The male reproductive cells of the father are exposed to radiation at the sperm stage, sperm cell stage, and spermatogonia stage. The radiation source is <60>Co gamma rays, and the radiation dose is 0Gy, 1.0Gy, 2.0Gy, 3.0Gy. DNA extraction and analysis of Pc-1 gene Sperm cell stage germ cell radiation exposure to the most sensitive to high, sudden change in the rate of radiation, and the amount of radiation between the effect of recognition In this case, the sudden variation rate of the paternal allele of Pc-1 was 9.1%, 22%, 28%, and 28%. In <252>the same way, the middle child is used in the middle child. Gamma rays in the same situation, sperm cell stage of germ cells, <252>Cf in sub-irradiation, sudden change in induction, the most intense sensitivity. The <252>variation rate of Pc-1 alleles in the paternal side of the irradiated mice was 0.35 Gy, 0.7 Gy and 1.02 Gy respectively, 18%, 26% and 24%. Pc-1 <252>gene locus RBE calculation for γ-ray induced by Cf irradiation was 5.9, 2.6, and 6.5 for sperm stage, sperm cell stage, and spermatogenic cell stage. The above-mentioned changes in the germ cells of Pc-1 are quantified by the method of quantitative analysis, and the changes in the germ cells of Pc-1 are modulated by the method of quantitative analysis.

项目成果

Fan, Y-J., Kamiya, K.,: "Dose-response of a radiation induction of a germline mutation at a hypervariable mouse minisatellite locus." Int. J. Radiat. Biol.68(2):. 177-183 (1995)

Fan, Y-J., Kamiya, K.，：“高变小鼠小卫星位点种系突变的辐射诱导的剂量反应。”

Niwa, O., Kamiya, K.,: "Association of Minisatellite instability with c-myc amplification and K-ras mutation in methylcholanthrene-induced mouse sarcomas." Cancer Res.55(23). 5670-5676 (1995)

Niwa, O., Kamiya, K.，：“甲基胆蒽诱导的小鼠肉瘤中小卫星不稳定性与 c-myc 扩增和 K-ras 突变的关联。”

Kamiya, K., et al.: "Evidence that carcinogenesis involves an imbalance between epigenetic high-frequency initiation and suppression of promotion." Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 92(5). 1332-1336 (1995)

Kamiya, K. 等人：“有证据表明致癌作用涉及表观遗传高频启动和促进抑制之间的不平衡。”