複製エラーを起こす損傷乗り越え型DNA合成酵素Revlの機能解析と発がん

导致复制错误和致癌的克服损伤的 DNA 合酶 Revl 的功能分析

• 批准号: 17013061
• 负责人: 神谷 研二
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17013061/
• 关键词: Rev1; 損傷乗り越えDNA合成; DNAポリメラーゼYファミリー; がん; 発がん高感受性; 突然変異; 遺伝的不安定性; DNA合成再構成系

高発癌性の色素性乾皮症バリアントの原因蛋白質が,損傷乗り越え型DNAポリメラーゼYファミリーに属するPolηであることから,損傷乗り越えDNA合成酵素の機能と発癌との関連が注目されている。Yファミリーに属するREV1は,error-proneのDNA修復に関与し,突然変異の誘発に重要な役割を担っている。我々は,損傷乗り越えDNA合成酵素REV1の機能と発癌との関連を調べるために以下の解析を行った。(1)Rev1トランスジェニックマウス(Rev1マウス)の作成と発癌感受性の検討変異原に高感度なマウスを開発する為に,Rev1を過剰発現したRev1マウスを作成した。プロモーターには,遺伝子発現の制御が可能なメタロチオネインプロモーターを用いた。各臓器でユビキタスなRev1発現を認めたマウスを用いて表現型解析を行った。T細胞を用いた放射線誘発のTCR突然変異頻度は,対照群に比べ高い傾向を認めた。化学発癌剤MNUによるリンパ腫の誘発では,対照群に比べ有意にリンパ腫発生頻度が上昇し,変異原に対し発がん高感受性マウスであることが確認された。(2)REV1の機能解析とin vitro再構成系の確立REV1は損傷部位に対してCを取り込む酵素であるが,加えて損傷乗り越えDNA合成経路全体を調節する第二の機能をもつことが示唆されている。生化学的解析により,REV1がssDNA結合活性をもち,ssDNAに結合したREV1はそのssDNA上をスライディングして,損傷部位にターゲティングされることを明らかにした。この性質はREV1に特異的であり,REV1の最初のターゲットがssDNAである可能性を示唆すると同時に,損傷乗り越えDNA合成経路全体を調節するREV1の第二の機能に関与する可能性がある。一方,in vitro再構成系を確立するためPolδ,PCNA,FFC,及びRPAの全ての構成蛋白を精製した。この蛋白質群をin vitroで再構成し,この系によりDNAが7kb以上合成されることを確認した。

The cause of high incidence of xeroderma pigmentosum is protein, damage, DNA synthesis enzyme function and cancer development. REV1 is involved in error-prone DNA repair, and is responsible for important service in the induction of sudden changes. The function of DNA synthase REV1 and its association with cancer are analyzed. (1) Rev1 is the first time that a cancer has been detected. In the case of a virus, it is possible to control the occurrence of a virus. The expression of each gene was determined by the expression of the gene. T cells use radiation to induce TCR sudden change frequency, contrast group than high middle tendency to recognize. The occurrence frequency of chemical agents MNU is higher than that of intentional agents MNU is higher than that of chemical agents MNU is higher than that of intentional agents MNU is higher than that of chemical agents MN (2) Functional analysis of REV1 and in vitro reconstitution-system establishment of REV1 from the damaged site to the C site to the enzyme, to the damaged site to the DNA synthesis pathway to the entire regulation of the second function. Biochemical analysis of REV1 ssDNA binding activity,ssDNA binding to REV1 ssDNA on the site of damage, damage site, damage site, damage site. These properties are specific to REV1, indicating the possibility of REV1's initial function as ssDNA, and the possibility of REV1's secondary function as DNA synthesis pathway regulator. One side,in vitro reconstitution system established, all constituent proteins of Polδ,PCNA,FFC, and RPA were refined. This protein group was reorganized in vitro, and the system was confirmed by DNA synthesis of more than 7kb.

项目成果

The first US-Japan meeting on error-prone DNA synthesis, Maui, Hawaii, December 20-21, 2004.

第一次美日关于易错 DNA 合成的会议，夏威夷毛伊岛，2004 年 12 月 20 日至 21 日。

• 发表时间: 2005
• 期刊: DNA Repair 4(6)
• 作者: Kamath-Loeb;AS.
• 通讯作者: AS.

Tumor Induction by Azoxymethane (AOM) and 2-Amino-1-methyl-6-phenylimidazo [4,5-b]pyridine (PhIP) in F344 Rat Gastric Mucosa Featuring Intestinal Metaplasia Caused by X-iiradiation

氧化偶氮甲烷 (AOM) 和 2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑[4,5-b]吡啶 (PhIP) 在 X 射线引起的 F344 大鼠胃粘膜中诱导肿瘤

• 发表时间: 2005
• 期刊: J.Exp.Clin.Cancer Res. 24(2)
• 作者: Kashiwabara;S.
• 通讯作者: S.

Decrease in size of azoxymethane induced colon carcinoma in F344 rats by 180-day fermented miso

180 天发酵味噌可减少 F344 大鼠中氧化偶氮甲烷诱导的结肠癌的大小

• 发表时间: 2005
• 期刊: Oncology Reports 14(6)
• 作者: Ohuchi;Y.
• 通讯作者: Y.

高い発がんinitiation頻度と正常細胞による発がん抑制

正常细胞高频率的致癌起始和抑制致癌作用

• 发表时间: 2005
• 期刊: 癌の臨床 51(5)
• 作者: Ohuchi;Y.;神谷研二
• 通讯作者: 神谷研二