ラット肝セリンアミノ転移酵素の2種のオルガネラ移行シグナルの相互作用の解析

大鼠肝脏丝氨酸转氨酶两种细胞器易位信号相互作用分析

• 批准号: 07680767
• 负责人: 小田 敏明
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07680767/
• 关键词: オルガネラ移行; 蛋白質の細胞内局在化; 細胞内移行シグナル; ミトコンドリア; ペルオキシゾーム

ラット肝セリン:ピルビン酸アミノ転移酵素(SPT)の二種の細胞内移行シグナル、ミトコンドリア移行シグナル(MTS)とペルオキシゾーム移行シグナル(PTS)を解析し、以下の結果を得た。1.ミトコンドリア移行シグナル---N末端22アミノ酸からなるMTS内の4つの塩基性アミノ酸を単独で酸性アミノ酸へ、あるいは中性アミノ酸へと変異させただけではミトコンドリア移行機能は損なわれなかった。またAla17、あるいはAsp22をヘリックスブレーカーであるProlineに変換してもミトコンドリア移行機能は損なわれなかった。しかし、5-22あるいは9-22の欠失はミトコンドリア移行機能を抑制し、産物は大部分、細胞質に検出されたが、1-3の欠失はミトコンドリア移行機能に変化を与えなかった。MTSのミトコンドリア移行機能は22アミノ酸のうち後半、N末端より9アミノ酸以降に存在し、前半部分はミトコンドリア移行機能に直接関係しないことが示唆された。2.ペルオキシゾーム移行シグナル---予備実験よりC末端付近がPTS機能を担っていることが示唆されていたので、そこに的を絞って、変異体を作製した。代表的なPTSとして報告されているPTS1、すなわちC末端のSer-Lys-Leuあるいはそれに類するモチーフそのものはSPTのC末には存在しないが、Asn-Lys-Leuという類似の配列が存在しているので、このNKL配列がPTS1と同様の機能を持つことが考えられた。事実、C末3アミノ酸を欠失したり、あるいはC末から2番目のLysをGlu,Glyに換えると産物はペルオキシゾームに局在できなくなった。またすぐ隣のC末から4番目のLysをGlu,Gly,Glnに換えたものも産物のペルオキシゾーム局在性は失われていた。このことはC末4番目のLysも含んだPTS1様配列がSPTのペルオキシゾーム移行に重要な役割を持っていることを示している。3.MTSとPTSの機能的関連---1.で述べたようにMTSの前半部はミトコンドリア移行機能に直接関与していないと考えられる。しかし、5-22欠失と9-22欠失とを詳しく比較すると、5-22欠失の方は一部ペルオキシゾームへの局在が見られるが、9-22欠失の方ではそれが見られず、すべて細胞質局在であった。このことはMTS前半部分にC末PTSの機能を抑制する働きがあることを示唆しており、MTS,PTS両シグナルを持つSPT前駆体が選択的にミトコンドリアへ移行することの原因である可能性がある。

Two kinds of intracellular migration of SPT (SPT): SPT and SPT. The following results are obtained from the analysis of the MTS (MTS) and PTS (PTS). 1.Microsilic acid---N-terminal 22 アミノ acid からなるMTS inner 4つの塩basic アミノ acid を単lone Acidic acid アミノ acid へ, あるいは Neutral アミノ acid へと変iso させたThe migration function of the だけではミトコンドリア is damaged by the なわれなかった.またAla17、あるいはAsp22をヘリックスブレーカーであるP roline's replacement function is the same as the migration function.しかし, 5-22 あるいは9-22 の无码はミトコンドリアmigratory function is suppressed, most of the products Points, cytoplasmic に検出されたが, 1-3 ののミトコンドリアmigration function に変化を and えなかった. MTS のミトコンドリアmigration function は22 アミノ acid のうち second half, N-terminal より9 アミノ acid There is a direct relationship between the existence of the drop and the migration function of the first half of the movement. 2. ペルオキシゾームShifting シグナル---Prepared with PTS function of C terminal closeっていることが出款されていたので, そこに's をtwisted って, 変variant を成した. Representative of the report of なPTS としてされているPTS1, すなわちC terminal のSer -Lys-Leuあるいはそれに级するモチーフそのものはSPTのCEndにはexistent しないが、Asn-Lys-Leuというsimilar のalignment がexistent しているので、このNKL is equipped with がPTS1 and the same function as つことが考えられた. Shimi, C end 3アミノ sour を owed loss したり, あるいは C end から 2nd chapter のLysをGlu, Gly is replaced by a product called Glue.またすぐ neighbor no C end から4th episode のLysをGlu, Gly, Gln に change え た も の ​​も product の ペ ル オ キ シ ゾ ー bureau in the nature は わ れ て い た.このことはC Final 4 Episode のLysもContains んだPTS1様alignedがSPTのペルオキシゾームIMPORTANT なservice cut をhold っていることをshow している. 3. The relationship between the functions of MTS and PTS ---1. The first half of MTS's migration function is directly related to the function of PTS.しかし、5-22 owed to lose と 9-22 owed to lose とを detail しく compare すると、5-22 owed to lose の方は一一ペルオキシThe ゾームへの Bureau is in が见られるが, the 9-22 loss is in の方ではそれが见られず, and the すべてcytoplasmic bureau is in であった.このことはMTS first half にC end PTS の function を inhibit する働きがあることをshows instigation しており、MTS,PT The reasons for the selection of the SPT front body and the reason for the migration are the possibilities.

项目成果

Ohbayashi,K.: "characterization of transcription from the downstreamstart site of the rat serine: prvavate / alanine: glycxylate aminotransferase gene." Biomed. Res.16. 141-153 (1995)

Ohbayashi,K.：“大鼠丝氨酸下游起始位点的转录特征：丙酸/丙氨酸：甘木酸转氨酶基因。”

Satoh,S.: "Quantitative cryoimmunogold electron microscopic studies on induction of serine: pyruvate aminotransferase in rat liver mitochondua by administratron of glucogon" Cell Struct. Funct.20. 89-96 (1995)

Satoh,S.：“对丝氨酸诱导的定量冷冻免疫金电子显微镜研究：通过施用胰高血糖素在大鼠肝线粒体中丙酮酸转氨酶”细胞结构。