蛋白質の細胞内局在化における新規リン脂質結合ドメインの役割

新型磷脂结合域在蛋白质亚细胞定位中的作用

• 批准号: 13877019
• 负责人: 住本 英樹
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13877019/
• 关键词: 蛋白質; PB2ドメイン; ホスホイノシチド; 小胞輸送; SH3ドメイン

私共は、SH3ドメインをもつオキシダーゼ特異的シグナル伝達蛋白質P47^<phox>とp40^<phox>(肩文字のphoxはphagocyte oxidaseを意味する)のN末領域が、出芽酵母の極性決定を担うシグナル伝達蛋白質Bem1pの一部と相同性をもつことに見い出し、PB2(Phox and Bem2)ドメインと命名していたが、P47^<phox>のPB2ドメインがリン脂質結合能(Pl(3)P, Pl(3,4)P2等のphosphoinositidesに特異的)をもち、細胞刺激時のp47^<phox>の膜移行とオキシダーゼ活性化に必須であることを明らかにした。このように、P47^<phox>が膜移行してオキシダーゼを活性化するためには「SH3を介したp22^<phox>(膜蛋白質: b_<558>の小サブユニット)との結合に加えて「PB2ドメインによる膜リン脂質との結合」も必要なわけである。またp47^<phox>のPB2ドメインの3次構造決定にも成功するとともに、PB2ドメインのphosphoinositides結合能がSH3ドメインとの分子内結合により負に制御されていることを見い出した。一方、P40^<phox>のPB2ドメインは、phosphoinositidesの中でもPl(3)Pに特異的に結合し、細胞内に発現させるとearly endosomeに局在することを明らかにした。さらに、他のendosomeの蛋白質であるVam7やsorting nexin3のPB2ドメインもPl(3)Pに特異的に結合することも示し、PB2ドメインがearly endosomeへの局在に重要なドメインであることを明らかにした。

The protein P47 <phox>^p40^^<phox>(shoulder letter phox phagocyte oxidase meaning) N terminal domain, budding yeast polarity determination, a part of protein Bem1p identity, PB2(Phox and Bem2) <phox>Lipid Binding Energy (LBP)(Pl(3)P, Pl (3, 4)P2 and other phosphoinositides are specific). The membrane transition and activation of p47^during cell stimulation <phox>must be clearly identified. P47^<phox>membrane migration and activation of SH3 protein p22^<phox>(membrane protein b<558>) binding to PB2 membrane lipid binding is necessary. The <phox>binding energy of phosphoinositides in p47 and PB2 molecules is determined by the third order structure. On the one hand, it is clear that P40^<phox>'s PB2 receptor binds specifically to Pl(3)P among phosphoinositides and is found in cells early in the genome. In addition, the protein of his endosome is Vam7, sorting nexin3 and PB2, and Pl(3)P is specifically bound to the protein. The protein of PB2 is early endosome, and the protein of PB2 is important.

项目成果

Ago, T., et al.: "The PX Domain as a Novel Phosphoinosaitide-Binding Module"Biochemical Biophysical Research Communications. 287.3. 733-738 (2001)

Ago, T. 等人：“PX 结构域作为新型磷酸肌醇结合模块”生物化学生物物理研究通讯。

Hiroaki, H., et al.: "Solution structure of the PX domain, a target of the SH3 domain"Nature Strctural Biology. 8.5. 526-530 (2001)

Hiroaki, H. 等人：“PX 结构域的解决方案结构，SH3 结构域的目标”《自然结构生物学》。

Ito, T., et al.: "Novel modular domain PB1 recognizes PC motif to mediate functional protein-protein interactions"EMBO Journal. 20.15. 3938-3946 (2001)

Ito, T. 等人：“新型模块化结构域 PB1 识别 PC 基序以介导功能性蛋白质-蛋白质相互作用”EMBO 杂志。

Shiose, A., et al.: "Nox4, a novel homologue of the phagocyte NADPH oxidase catalytic subunit gp91^<phox>"Amsterdam The Netherlands, Elsevier Science(in press). (2002)

Shiose, A. 等人：“Nox4，吞噬细胞 NADPH 氧化酶催化亚基 gp91^<phox> 的新型同源物”，荷兰阿姆斯特丹，爱思唯尔科学（出版中）。

Terasawa, H., et al.: "Structure and ligand recognition of the PB1 domain : a novel protein module capable of binding PC motif-containing protein"EMBO Journal. 20.15. 3947-3956 (2001)

Terasawa, H. 等人：“PB1 结构域的结构和配体识别：一种能够结合含有 PC 基序的蛋白质的新型蛋白质模块”EMBO 杂志。