Transforming RNAによる細胞がん化機構の解析

转化RNA分析细胞癌变机制

• 批准号: 14657057
• 负责人: 濱田 勝友
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657057/
• 关键词: transforming RNA; 分泌蛋白合成; 膜蛋白; eIF-4E; シグナル伝達; 4E-BP1; 細胞膜イオンポンプ蛋白; 発ガン遺伝子; U5 RNA; ribosome; polypurine配列; signal recognition particle; TIG3細胞; signal transduction pathway; ヒトHeLa細胞; ヒトTIG3細胞; c-myc; bicistronic Plasmid; cap-independent

Transforming RNAによる分泌蛋白合成の抑制作用を明らかにした後、以下の検討を行なった。膜蛋白質の量的減少に伴うシグナル伝達異常の有無について調べた。翻訳開始蛋白質eIF-4Eは、細胞質内において量的に限定されていることが知られている。分泌蛋白全般の合成が抑制される状況においてこの翻訳開始因子は非分泌蛋白合成の亢進に向かう可能性が考えられる。事実、TR発現細胞においてeIF-4Eの蛋白レベルは上昇して観察された。結果的に非分泌蛋白合成は亢進していると考えるのは妥当と思われた。また、eIF-4Eは強発現においてNIH3T3細胞を悪性転換させる報告がなされ発ガン遺伝子のひとつとして考えられている。しかしながら、eIF-4Eおよびその調節蛋白である4E-BP1のリン酸化について詳細に検討したが対照細胞に比して有意な差異は観察されなかった。4E-BP1に関してwortwanninおよびrapamycin等の薬剤を使用して検討したがPI3K-Akt-FRAP/mTORの経路における異常を示唆する成績は得られなかった。さらに、細胞膜カルシウムポンプ蛋白質、PMCA、のwestern blotによる成績は明らかなレベル低下を示したが、^<45>Caの取り込みに関して対照に比べ有意な差異は観察されなかった。これらの成績からカルシウムシグナル伝達経路に有意な異常は観察されなかった。また、これらの仕事を通じて、TRによる直接的な蛋白合成抑制からくるさまざまな細胞膜イオンポンプ蛋白レベル低下に伴う変化がTR-形質転換の有意な要因となる可能性を否定した。In vitroヒト正常細胞の形質転換に関して、TR単独、あるいは発ガン遺伝子(c-myc, H-ras, eIF-4E)との共発現において実験した。少なくともこれらの発ガン遺伝子の関与を示唆する所見は得られなかった。

Transforming RNA secreting protein synthesis inhibition effect after the beginning of the next step, the following discussion A decrease in the amount of membrane protein is accompanied by a decrease in the amount of membrane protein. EIF-4E is a protein that regulates the amount of protein in the cytoplasm. Secreted protein synthesis is inhibited in all cases, and the initiation factor is not inhibited in all cases. The expression of eIF-4E protein in TR cells increased rapidly. As a result, the production of non-secreted proteins was increased. eIF-4E is strongly expressed in NIH 3T3 cells. EIF-4E and EBP-1 regulatory proteins were examined in detail in response to cellular differences. 4E-BP1 is related to the use of wortwannin and rapamycin, etc., and the results of PI3K-Akt-FRAP/mTOR circuit abnormality are discussed. In addition, cell membrane protein, PMCA, and western blot results show that there are significant differences in cell membrane protein, PMCA, and western blot results<45>. The results of this study are as follows: The possibility of direct inhibition of protein synthesis due to TR-type protein exchange is denied. In vitro, normal cells are characterized by morphological changes, TR isolation, and co-occurrence of c-myc, H-ras, and eIF-4E. A small amount of information is available to the public.