飛行時間型質量分析(DE MALDI TOF/MS)のリピドーシス診断への応用

飞行时间质谱（DE MALDI TOF/MS）在脂质沉积症诊断中的应用

• 批准号: 14657186
• 负责人: 山口 清次
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Shimane Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657186/
• 关键词: 飛行時間型質量分析計; MALDI TOF-MS; スフィンゴ脂質; リピドーシス; 先天代謝異常; 神経変性; 飛行型質量分析計; MALDI TOF; MS; リン資質; ニーマンピック病; ゴーシェ病; ファブリー病

平成15年度、飛行型質量分析計(MALDI TOF-MS)をスフィンゴリピドーシスの診断・病態解明への目的に応用する試みを行い以下のような成果を得た。1)硝子体混濁を合併したGaucher病患者の硝子体中の脂質をMALDI TOF-MS分析を行った。患者でceramide monohexoside(CMH)のピークが明瞭に検出され、コントロールでは検出感度以下であった。sphingomyelinのピークは両者にみとめられ、Gaucher病患者の硝子体にCMHが蓄積していたことを示している。Gaucher病患者の硝子体中のCMHの蓄積を報告したのは本報告が初めてである。また硝子体中に蓄積したCMHの分子種(脂肪酸構成)には、肝臓、皮膚線維芽細胞、血清とは異なる特徴がみとめられた。2)うっ血性心不全のため心臓弁置換術を受けたFabry病男性患者の大動脈弁と僧房弁から脂質を抽出しMALDI TOF-MS分析を行った。内部標準物質としてリゾスフィンゴミエリンを加え、組織中のceramide trihexoside(CTH)の定量分析を試みた。Fabry病で蓄積するCTHは標準物質を用いて定量を試みたたところ、CTHの検量線は直線性を示した。少なくとも組織中CTHは半定量評価のできることを確認した。Fabry病患者の心臓弁中のCTH含量の増加を定量的に評価することができた。以上の結果、MALDI TOF/MSはリピドーシスの診断に使用できることを確認した、そして以下の点ですぐれていると思われる。a)分析の感度が非常によく、微量のサンプル中の脂質を分析することが可能である。b)スフィンゴ脂質の量のみならず分子種(スフィンゴ脂質中の脂肪酸構成)も知ることができる。本分析法は、臨床医学の分野への応用が十分に期待できる。

In 2015, MALDI TOF-MS was used to diagnose and diagnose diseases. 1)MALDI TOF-MS analysis of lipids in nitrates from patients with Gaucher disease Patients with ceramide monohexoside(CMH) have been found to be sensitive to the following conditions: In patients with Gaucher's disease, CMH accumulates. CMH accumulation in Gaucher disease patients The molecular species (fatty acid composition) of CMH accumulated in nitrates, liver, skin, vascular cells, serum and other characteristics 2) MALDI TOF-MS analysis of arterial function and lipid extraction in male patients with coronary heart disease Internal reference material: ceramide trihexoside(CTH) CTH is a standard substance that accumulates in the sample. A semi-quantitative evaluation of the effect of the chemical on the growth and development of human beings. Quantitative evaluation of increased CTH levels in the cardiac function of Fabry patients The above results, MALDI TOF/MS diagnosis and use of the following points to confirm, and also to consider a) The sensitivity of the analysis is very high, and the analysis of lipids in trace amounts is possible. b) The amount of lipids in the molecule species (fatty acid composition of lipids) is known. This analysis method is expected to be very useful in the field of clinical medicine.

项目成果

Fujiwaki T: "Application of delayed extraction matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry for analysis of sphingolipids in cultured skin fibroblasts from sphingolipidosis patients"Brain & Development. 24. 170-173 (2002)

Fujiwaki T：“应用延迟提取基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析鞘脂沉积症患者培养的皮肤成纤维细胞中的鞘脂”大脑

山口清次: "医療分野における質量分析:先天代謝異常診断への応用"Clean Technology. 13(8). 17-21 (2003)

Seiji Yamaguchi：“质谱在医学领域：在先天性代谢缺陷诊断中的应用”清洁技术 13(8)。

山口清次: "有機酸・脂肪酸代謝異常症のマス・スクリーニングの意義"特殊ミルク情報. 39. 12-19 (2003)

Seiji Yamaguchi：“有机酸/脂肪酸代谢紊乱的大规模筛查的意义”特殊牛奶信息。 39. 12-19 (2003)

Fujiwaki T: "Application of delayed extraction-matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry for analysis of sphingolipids in pericardial fluid, peritoneal fluid and serum from Gaucher disease patients"J Chromat B. 776. 115-

Fujiwaki T：“应用延迟提取基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析戈谢病患者心包液、腹膜液和血清中的鞘脂”J Chromat B. 776. 115-