MALDI-TOF MSを使用したカルバペネマーゼ産生菌検出法の確立

MALDI-TOF MS检测产碳青霉烯酶细菌方法的建立

• 批准号: 15H00617
• 负责人: 児矢野 早穂
• 金额: $ 0.26万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15H00617/
• 关键词: MALDI-TOF MS; カルバペネマーゼ; IMP-1型メタロβ-ラクタマーゼ

【目的】カルバペネム系抗菌薬は、広い抗菌スペクトルと強力な抗菌作用により、重症感染症の治療に有効な抗菌薬として広く使用されているが、近年、カルバペネム系抗菌薬耐性腸内細菌科細菌による感染症が拡大し、世界中で問題となっている。本研究では、MALDI-TOF MSを使用したカルバペネマーゼ産生腸内細菌科細菌の検出方法を検討し、日常検査における検査手順の確立することを目的とした。【方法】2009年4月から2012年3月に当院で臨床分離されたメタロβ-ラクタマーゼ(IMP-1)産生腸内細菌科細菌20株、KPC型カルバペネマーゼ産生標準菌株1株、およびNDM-1型メタロβ-ラクタマーゼ産生標準菌株1株を対象とした。菌の抽出およびMALDI Biotyper (BRUKER社)による解析は、Hrabakらの方法を用い、メロペネム分解時のピークの出現および消失を確認した。陰性対照には、カルバペネマーゼ非産生株であるEnterobacter cloacaeの標準菌株1株、K. pneumoniaeの標準菌株1株および臨床分離株2株を使用した。【結果】Hrabakらの方法を用いて解析を行った結果、カルバペネマーゼ陽性一致率は18/22株(81.8%)であり、陰性一致率は4/4株(100%)であった。判定が一致しなかったカルバペネマーゼ陽性株4株はいずれも、メロペネム分解時に消失する406.5Daのピークが認められた。それ以外のピークの出現および消失は、すべて一致していた。【結語】今回検討した株において、一部の菌株を除き、MALDI-TOF MSを使用してカルバペネマーゼ産生の有無を判定することが可能であった。今後は、OXA型カルバペネマーゼ産生菌、カルバペネマーゼ産生ブドウ糖非発酵菌についても検討し、日常検査への導入を目指す予定である。

[objective] in recent years, there have been many problems in the treatment of severe infections, such as the use of antimicrobial agents, and the use of antimicrobial agents in the treatment of severe infections. In this study, MALDI-TOF MS was used in this study. In this study, we used the method of exudation of bacteria in the department of mycology, and the routine method was used to confirm the purpose of the study. [methods] from April 2009 to March 2012, 20 strains of Bacteriaceae, 1 strain of KPC type, and 1 strain of NDM- type 1 were isolated from the hospital. There were 20 strains of β-mycobacteria, 1 strain of KPC and 1 strain of β-mycobacterium in the hospital. The bacteria were extracted and analyzed by MALDI Biotyper (BRUKER). When the bacteria were extracted and analyzed, the bacteria were analyzed and confirmed that the bacteria disappeared when they were decomposed by the method of Hrabakim. There were 1 standard strain of non-fertile plant, 1 standard strain of K. pneumoniae, and 2 strains isolated from the bed of K. pneumoniae. [results] the results of Hrabak assay were used to analyze the results, the sexual consistency rate was 18% in 22 strains (81.8%) and 4 strains in 4 strains (100%). It was determined that the 4 isolates were isolated from the same population and disappeared as soon as they were decomposed, and the 406.5Da response was detected. In addition, it has been found that it has disappeared and is consistent with each other. [results] this time, one strain was eliminated, and MALDI-TOF MS was used to determine the possibility of infection. [results] this time, there was no way to determine the possibility of infection. [results] this time, one strain was deleted, and one strain was eliminated. In the future, OXA type bacteria, OXA type bacteria, sugar non-fermentative bacteria, non-fermentative bacteria, daily bacteria, and so on.