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低酸素状態における放射線感受性とミトコンドリアDNA

低氧条件下的放射敏感性和线粒体 DNA

基本信息

批准号：
14657216
负责人：
井上武宏
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

これまでにヒト繊維芽細胞と骨肉腫細胞においてミトコンドリアDNA(mtDNA)の有無はコロニー形成能で表される放射線感受性を直接には左右しないことを明らかにした。またmtDNAの有無は微小核形成能の大小にと相関し、その差は細胞内ATPレベルと対応しており細胞内ATP依存性の微少核形成経路の存在が示唆された。そこで今回低酸素状態での放射線感受性とミトコンドリアDNAの関連を明らかにするために低酸素状態でのコロニー形成能試験、微小核生成能試験、コメットアッセイを行った。使用した細胞はヒト繊維芽細胞と骨肉腫細胞で、それぞれmtDNAの有る親細胞株(ρ+細胞)、無い変異細胞株(ρ-細胞)を用いた。低酸素状態作成には、試験管内に300μlの細胞浮遊液を入れ、40分間窒素95%、二酸化炭素5%よりなる気体で置換を行った。結果:酸素分圧測定では低酸素状態の酸素分圧は8mmHg以下であった。コロニー形成能試験、微小核生成能試験、コメットアッセイいずれの実験でも低酸素状態では放射線照射によりρ+細胞とρ-細胞共に著しい放射線抵抗性となった。コロニー形成能試験での酸素増感比はほぼ3であった。コロニー形成能試験とコメットアッセイではρ+細胞とρ-細胞間の差は認められなかった。しかし微小核生成では低酸素状態においてもρ+細胞の微小核生成能がρ-細胞より大きかった。40分間の気体置換による低酸素状態におけるATPレベルの変化を測定した所、有酸素状態と比較してATPの有意な減少はなかった。考察:今回の低酸素実験ではATP量の変動はなかったが、これまでの報告と同様酸素増感比は3倍を越え放射線感受性は大きく低下した。したがって今回の放射線感受性低下は放射線による障害-特に間接作用・ラジカルの減少によるものと考えられる。

In addition, the expression of DNA(mtDNA) and its ability to form DNA can be directly detected by the cell culture medium. The presence or absence of mtDNA is related to the size of micronucleus formation, and the difference between mtDNA and ATP is related to the existence of ATP dependent micronucleus formation pathways in cells. The relationship between radiosensitivity and DNA in the present hypoacid state is clearly defined by the ability to form nuclei, the ability to form micronuclei, and the ability to form nuclei. The use of mtDNA in vitro, in vitro The low acid state is prepared by adding 300μl of cell suspension solution into the test tube, adding 95% of acid solution and 5% of carbon solution into the test tube. Results: The acid partial pressure measurement was below 8mmHg in the low acid state. In the case of nuclear energy test, nuclear energy test, nuclear energy The formation of the acid can be tested by the acid sensitivity test. The formation of a cell can be controlled by a cell + cell or a cell-cell difference. Microkaryogenesis is in a low acid state, and microkaryogenesis is in a low acid state. 40 minutes of gas replacement, low acid state, ATP change, determination, acid state, comparison, ATP intentional reduction, Investigation: The amount of ATP in the low acid content of this paper is 3 times higher than that in the high radiation sensitivity. The radiation sensitivity of the current cycle is reduced, and the radiation is harmful to the environment.